以冻融法快速纯化高活力基因工程Taq DNA聚合酶

来源 :江西农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tekken1981

【摘要】

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用含有Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli DH5α菌株,IPTG诱导表达Taq DNA聚合酶.利用该酶的热稳定性,反复2次-70℃、75℃交替冻融以裂解细胞释放胞浆;以高速离心除

【作者】

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孙亮先骆红梅董海涛李德葆

【机构】

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浙江大学生物技术研究所

【出处】

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江西农业大学学报

【发表日期】

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2001年4期

【关键词】

：

TAQ DNA聚合酶纯化聚合酶链式反应 PCR技术冻融法基因工程 Taq DNA polymerase freezing-thawing purif

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用含有Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli DH5α菌株,IPTG诱导表达Taq DNA聚合酶.利用该酶的热稳定性,反复2次-70℃、75℃交替冻融以裂解细胞释放胞浆;以高速离心除去冻融变性的细胞碎片及核酸蛋白的复合物以达到快速纯化Taq DNA聚合酶的目的.PCR扩增反应和SDS-PAGE分析表明所制备的Taq DNA聚合酶的纯度、活力、敏感性、特异性均达到试验要求.该方法具有快速简便的优点.

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