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摘 要：本文采用高校液相测定了注射用盐酸头孢替安中盐酸头孢替安的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5μm），甲醇-乙腈-0.2mol/L磷酸二氢钾-冰醋酸（15：15：69：1）为流动相，检测波长为254nm，流速1.0mL·min-1，柱温：30℃。盐酸头孢替安在5～80μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。盐酸头孢替安的平均回收率为99.5%，RSD为0.83%（n=6）；此方法简便、准确、重现性好，可用于注射用盐酸头孢替安中盐酸头孢替安的含量测定。
关键词：注射用盐酸头孢替安；盐酸头孢替安；含量
盐酸头孢替安对革兰氏阴性菌和阳性菌都有广泛的抗菌作用，尤其对大肠杆菌、克雷白杆菌属、奇异变形杆菌等具有良好的抗菌活性。盐酸头孢替安适用于对本品敏感的葡萄球菌属、肺炎球菌、流感杆菌、大肠杆菌、枸橼酸杆菌属、奇异变形杆菌、摩根氏变形杆菌等所致下列感染：败血症，术后感染，烧伤感染，骨髓炎，化脓性关节炎，支气管炎，肺炎，腹膜炎，肾盂肾炎，膀胱炎，尿路炎，前列腺炎，脑脊膜炎，子宫内膜炎，盆腔炎，子宫旁组织炎，附件炎等。本文采用高校液相测定了注射用盐酸头孢替安中盐酸头孢替安的含量。
1 仪器与试药
美国必能信超声波清洗机（北京星越天成科技有限公司）；Aurora-F1实验室自动洗瓶机（杭州喜瓶者生物技术有限公司）；1810-B石英自动双重蒸馏水器（上海康路仪器设备有限公司）；STI-501Plus等度高效液相色谱仪（赛智科技（杭州）有限公司）；PA225型DCPA卓越电子分析天平（上海金鹏分析仪器有限公司）；HWY-501A型恒温水浴（上海昌吉地质仪器有限公司）；中扬EDI高纯水系统一体机（北京中扬永康环保科技有限公司）；STI-501Plus梯度高效液相色谱仪（上海色谱仪器有限公司）；UV2800双光束紫外可见分光光度计（四川汇巨仪器设备有限公司）。盐酸头孢替安对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（北京京科瑞达科技有限公司）、硝酸（上海拜力生物科技有限公司）、吡啶二羧酸（上海拜力生物科技有限公司）、磷酸二氢钾（上海拜力生物科技有限公司）、甲醇（青岛市金宏鑫化工有限公司）、冰醋酸（上海拜力生物科技有限公司）、三乙胺（北京迈瑞达科技有限公司）、磷酸（上海盈公生物技术有限公司）、醋酸钠（北京京科瑞达科技有限公司）、磷酸二氢铵（上海盈公生物技术有限公司）。
2 含量测定
2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5μm）；甲醇-乙腈-0.2mol/L磷酸二氫钾-冰醋酸（15：15：69：1）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按盐酸头孢替安峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取注射用盐酸头孢替安，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人流动相10ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）5分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，取续滤液，即得。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取盐酸头孢替安对照品约20mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含10μg的溶液，作为对照溶液。
2.4 阴性溶液的制备
依照处方取无水碳酸钠，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照供試品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在盐酸头孢替安出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 准曲线的制备
制备浓度为5、10、20、40、60、80μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，盐酸头孢替安对照品在5～80μg·mL-1范围内线性关系良好。
2.6 精密度试验
依照2.4项下制备对照品溶液，精密吸取盐酸头孢替安对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.66%。结果表明，本实验精密度良好。
2.7 重现性试验
分别称取同批注射用盐酸头孢替安样品6份，分别依照2.3项下供试品制0.79%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.8 稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4，6小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品盐酸头孢替安峰面积积分值的RSD为0.53%。结果表明盐酸头孢替安至少在6小时内稳定。
2.9 回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的盐酸头孢替安对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.5%，RSD为0.83%。
2.10 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定注射用盐酸头孢替安三批样品中盐酸头孢替安的含量，含量为标示量的100.1%、99.6%、99.7%。
3 讨论
分别考察含1%醋酸0.025mol.L-1醋酸铵溶液-乙腈（75∶25），甲醇-水（35：65），甲醇-乙腈-0.2mol/L磷酸二氢钾-冰醋酸（15：15：69：1），乙腈-1%冰醋酸溶液（20∶80），（1.7mmol/L硝酸+0.7mmol/L吡啶二羧酸溶液）-乙腈（95：5），0.02mol·L-1 NH4Ac水溶液-乙腈（95∶5），0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈-冰醋酸（70：30：1），水-乙腈-三乙胺（80∶20：0.01）不同比例的流动相，结果以甲醇-乙腈-0.2mol/L磷酸二氢钾-冰醋酸（15：15：69：1）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-乙腈-0.2mol/L磷酸二氢钾-冰醋酸（15：15：69：1）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于注射用盐酸头孢替安中盐酸头孢替安的含量测定。注射用盐酸头孢替安中盐酸头孢替安的含量为标示量的105%-95%。
参考文献
[1]郑芳，朱雪松，李春雷，李志浩，陈莉莉，陈光辉.注射用头孢替安与盐酸氨溴索注射液的配伍稳定性考察[J].中国药房，2011（34）.
[2]周顺光，杨定勇，李勇，李荣东.反相高效液相色谱法测定盐酸头孢替安酯含量及有关物质[J].中南药学，2011（10）.
[3]颜冬梅，郑晓亮，屠凌岚.HPLC测定注射用盐酸头孢替安含量[J].中国现代应用药学，2009（S1）.
[4]陆进，李淑芳，马秉智，陈永晨.头孢替安与3种输液的配伍稳定性[J].中国医院药学杂志，2008（11）.
[5]胡忠杰，周蕾，苗佩宏.注射用盐酸头孢替安与木糖醇注射液的配伍稳定性考察[J].中国药房，2007（08）.
关键词：注射用盐酸头孢替安；盐酸头孢替安；含量
盐酸头孢替安对革兰氏阴性菌和阳性菌都有广泛的抗菌作用，尤其对大肠杆菌、克雷白杆菌属、奇异变形杆菌等具有良好的抗菌活性。盐酸头孢替安适用于对本品敏感的葡萄球菌属、肺炎球菌、流感杆菌、大肠杆菌、枸橼酸杆菌属、奇异变形杆菌、摩根氏变形杆菌等所致下列感染：败血症，术后感染，烧伤感染，骨髓炎，化脓性关节炎，支气管炎，肺炎，腹膜炎，肾盂肾炎，膀胱炎，尿路炎，前列腺炎，脑脊膜炎，子宫内膜炎，盆腔炎，子宫旁组织炎，附件炎等。本文采用高校液相测定了注射用盐酸头孢替安中盐酸头孢替安的含量。
1 仪器与试药
美国必能信超声波清洗机（北京星越天成科技有限公司）；Aurora-F1实验室自动洗瓶机（杭州喜瓶者生物技术有限公司）；1810-B石英自动双重蒸馏水器（上海康路仪器设备有限公司）；STI-501Plus等度高效液相色谱仪（赛智科技（杭州）有限公司）；PA225型DCPA卓越电子分析天平（上海金鹏分析仪器有限公司）；HWY-501A型恒温水浴（上海昌吉地质仪器有限公司）；中扬EDI高纯水系统一体机（北京中扬永康环保科技有限公司）；STI-501Plus梯度高效液相色谱仪（上海色谱仪器有限公司）；UV2800双光束紫外可见分光光度计（四川汇巨仪器设备有限公司）。盐酸头孢替安对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（北京京科瑞达科技有限公司）、硝酸（上海拜力生物科技有限公司）、吡啶二羧酸（上海拜力生物科技有限公司）、磷酸二氢钾（上海拜力生物科技有限公司）、甲醇（青岛市金宏鑫化工有限公司）、冰醋酸（上海拜力生物科技有限公司）、三乙胺（北京迈瑞达科技有限公司）、磷酸（上海盈公生物技术有限公司）、醋酸钠（北京京科瑞达科技有限公司）、磷酸二氢铵（上海盈公生物技术有限公司）。
2 含量测定
2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5μm）；甲醇-乙腈-0.2mol/L磷酸二氫钾-冰醋酸（15：15：69：1）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按盐酸头孢替安峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取注射用盐酸头孢替安，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人流动相10ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）5分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，取续滤液，即得。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取盐酸头孢替安对照品约20mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含10μg的溶液，作为对照溶液。
2.4 阴性溶液的制备
依照处方取无水碳酸钠，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照供試品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在盐酸头孢替安出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5 准曲线的制备
制备浓度为5、10、20、40、60、80μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，盐酸头孢替安对照品在5～80μg·mL-1范围内线性关系良好。
2.6 精密度试验
依照2.4项下制备对照品溶液，精密吸取盐酸头孢替安对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.66%。结果表明，本实验精密度良好。
2.7 重现性试验
分别称取同批注射用盐酸头孢替安样品6份，分别依照2.3项下供试品制0.79%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.8 稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4，6小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品盐酸头孢替安峰面积积分值的RSD为0.53%。结果表明盐酸头孢替安至少在6小时内稳定。
2.9 回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的盐酸头孢替安对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.5%，RSD为0.83%。
2.10 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定注射用盐酸头孢替安三批样品中盐酸头孢替安的含量，含量为标示量的100.1%、99.6%、99.7%。
3 讨论
分别考察含1%醋酸0.025mol.L-1醋酸铵溶液-乙腈（75∶25），甲醇-水（35：65），甲醇-乙腈-0.2mol/L磷酸二氢钾-冰醋酸（15：15：69：1），乙腈-1%冰醋酸溶液（20∶80），（1.7mmol/L硝酸+0.7mmol/L吡啶二羧酸溶液）-乙腈（95：5），0.02mol·L-1 NH4Ac水溶液-乙腈（95∶5），0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈-冰醋酸（70：30：1），水-乙腈-三乙胺（80∶20：0.01）不同比例的流动相，结果以甲醇-乙腈-0.2mol/L磷酸二氢钾-冰醋酸（15：15：69：1）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-乙腈-0.2mol/L磷酸二氢钾-冰醋酸（15：15：69：1）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于注射用盐酸头孢替安中盐酸头孢替安的含量测定。注射用盐酸头孢替安中盐酸头孢替安的含量为标示量的105%-95%。
参考文献
[1]郑芳，朱雪松，李春雷，李志浩，陈莉莉，陈光辉.注射用头孢替安与盐酸氨溴索注射液的配伍稳定性考察[J].中国药房，2011（34）.
[2]周顺光，杨定勇，李勇，李荣东.反相高效液相色谱法测定盐酸头孢替安酯含量及有关物质[J].中南药学，2011（10）.
[3]颜冬梅，郑晓亮，屠凌岚.HPLC测定注射用盐酸头孢替安含量[J].中国现代应用药学，2009（S1）.
[4]陆进，李淑芳，马秉智，陈永晨.头孢替安与3种输液的配伍稳定性[J].中国医院药学杂志，2008（11）.
[5]胡忠杰，周蕾，苗佩宏.注射用盐酸头孢替安与木糖醇注射液的配伍稳定性考察[J].中国药房，2007（08）.