戊型肝炎病毒基因ORF3编码蛋白在大肠杆菌中的表达及鉴定

来源 :微生物学免疫学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qnmdmmm

【摘要】

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实验以两种不同的表达策略构建了两个以大肠杆菌DE3为宿主的原核表达载体,由T7启动子启动外源基因的转录,在诱导剂IPTG诱导下成功地进行了戊肝病毒ORF3蛋白的原核表达.并通过

【作者】

：

李启明沈心亮蒋琳雷清刘鹏

【机构】

：

兰州生物制品研究所

【出处】

：

微生物学免疫学进展

【发表日期】

：

2003年2期

【关键词】

：

戊型肝炎病毒开读框架原核表达融合蛋白 Hepatitis E virus(HEV)Open reading frame3 (ORF3)Prokaryoti

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实验以两种不同的表达策略构建了两个以大肠杆菌DE3为宿主的原核表达载体,由T7启动子启动外源基因的转录,在诱导剂IPTG诱导下成功地进行了戊肝病毒ORF3蛋白的原核表达.并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹、竞争抑制法酶联免疫等一系列实验对两种表达产物进行了鉴定和分析.综合分析两种表达结果发现,在融合型表达中ORF3蛋白与其融合标签蛋白(谷胱甘肽S-转移酶)之间存在免疫交叉反应,而且这种融合标签蛋白在空间结构上可能对ORF3蛋白中的抗体结合位点有掩盖作用.

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