【摘 要】
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目的 验证人瘢痕疙瘩成纤维细胞中钙/钙调蛋白依耐性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin dependent serine protein kinase,CASK)/分化抑制因子1(inhibitors of differentiation 1,Id1)通路的存在及意义。方法通过免疫荧光激光共聚焦证实瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞中CASK和Idl蛋白表达和定位;RT—PCR和West
【机 构】
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目的 验证人瘢痕疙瘩成纤维细胞中钙/钙调蛋白依耐性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin dependent serine protein kinase,CASK)/分化抑制因子1(inhibitors of differentiation 1,Id1)通路的存在及意义。方法通过免疫荧光激光共聚焦证实瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞中CASK和Idl蛋白表达和定位;RT—PCR和Western—blot分析瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞中CASK和Idl的表达和差异;通过免疫沉淀验证瘢痕疙瘩成纤维细胞中CASK和Idl蛋白的天然结合。结果正常情况下体外培养的瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞中均存在CASK和Idl蛋白的表达,CASK和Idl主要分布在成纤维细胞胞浆和胞核中;RT.PCR结果表明瘢痕疙瘩组CASKmRNA的表达量为0.658±0.024,低于正常对照组的1.0764±0.008(t=11.159,P〈0.05);Id1的表达量为0.497±0.014,高于正常对照组的0.307±0.017(t=15.148,P〈0.05);Western-blot结果表明瘢痕疙瘩组CASK蛋白的表达量为0.057±0.006,低于正常对照组的0.1684-0.012(t=13.524,P〈0.05);Idl的表达量为0.8124±0.035,高于正常对照组的0.3684±0.031(t=16.356,P〈0.05);免疫沉淀结果显示,CASK沉淀物中能检测到Id1,Id1沉淀物中能检测到CASK,CASK和Idl在瘢痕疙瘩成纤维细胞中存在天然结合。结论可能存在CASK/Id1信号通路参与了瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,这与瘢痕疙瘩的发生存在一定联系。
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