猪脱细胞真皮基质对小鼠创面毛囊再生中基质细胞衍生因子-1及Wnt3a/β-catenin信号通路表达的影响

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目的探讨猪脱细胞真皮基质(ADM)对小鼠创面毛囊再生中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及Wnt3a/β-catenin信号通路表达的影响。方法取新鲜猪皮,经脱细胞处理后制成微粒状,灭菌,密封,常温保存,以备后面实验使用。制作18只C57BL/6小鼠背部全层皮肤缺损模型,以脊柱为中线,在左右各制作直径为6 mm的缺损,左右侧分别以纱布和猪ADM覆盖,隔天纱布侧换药,猪ADM侧不做处理,于模型建立第7天,按照所用材料不同分为纱布组与猪ADM组,再按所取部位不同分为纱布窗口组、猪ADM窗口组、纱布创面组、猪ADM创面组、纱布创缘组、猪ADM创缘组,其中9只小鼠组织用于蛋白质印迹法检测,另外9只小鼠组织用于免疫组织化学检测。通过蛋白质印迹法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、β-catenin、转化生长因子-β(TGF-β)、Wnt3a、血管内皮生长因子(VEGF)、SDF-1、成纤维细胞生长因子(FGF) 2、FGF9、AKT的蛋白表达,免疫组织化学检测Wnt3a、SDF-1、FGF2、FGF9的表达。数据比较采用独立样本t检验。结果在小鼠模型建立第7天创面中,蛋白质印迹法检测β-catenin、Wnt3a、SDF-1的蛋白表达量均是猪ADM窗口组(0. 533±0. 058、0. 446±0. 039、0. 972±0. 048)高于纱布窗口组(0. 401±0. 005、0. 132±0. 022、0. 175±0. 036),差异均有统计学意义(t=3. 996、12. 230、23. 130,P值均小于0. 05)。β-catenin、Wnt3a、SDF-1的蛋白表达量均是猪ADM创面组(0. 557±0. 009、0. 626±0. 066、0. 868±0. 102)高于纱布创面组(0. 302±0. 010、0. 109±0. 019、0. 036±0. 009),差异均有统计学意义(t=32. 830、13. 020、14. 130,P值均小于0. 05)。Wnt3a、SDF-1的蛋白表达量均是猪ADM创缘组(0. 419±0. 014、0. 370±0. 069)高于纱布创缘组(0. 115±0. 020、0. 056±0. 007),差异均有统计学意义(t=21. 460、7. 825,P值均小于0. 05)。免疫组织化学检测结果显示Wnt3a、SDF-1、FGF2、FGF9在猪ADM组中的表达高于纱布组,且阳性细胞主要分布于毛囊细胞周围。结论猪ADM在小鼠创面中可能通过上调SDF-1及Wnt3a/β-catenin信号通路的表达而促进毛囊的再生。
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