【摘 要】
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目的 研究DCK对宫颈癌HeLa细胞增殖及侵袭活性影响, 对HeLa细胞顺铂及放疗的敏感性影响.方法 siRNA干扰DCK基因在HeLa细胞中的表达. CCK-8实验、克隆形成试验及细胞侵袭实验
【机 构】
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江苏连云港市赣榆区人民医院检验科 江苏省连云港市, 222100江苏省连云港市赣榆区人民医院妇科 江苏省连云港市, 222100;
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目的 研究DCK对宫颈癌HeLa细胞增殖及侵袭活性影响, 对HeLa细胞顺铂及放疗的敏感性影响.方法 siRNA干扰DCK基因在HeLa细胞中的表达. CCK-8实验、克隆形成试验及细胞侵袭实验分别检测DCK基因敲减后细胞增殖、克隆形成及侵袭能力变化.不同浓度顺铂或不同剂量放射线处理HeLa对照及DCK敲减细胞, CCK-8检测细胞增殖活性变化.利用细胞自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤、自噬诱导剂雷帕霉素及不同放射剂量处理HeLa对照及DCK敲减细胞, 检测细胞增殖活性及自噬活化标记 LC-Ⅱ, 揭示DCK在放射诱导细胞自噬中的作用.结果 DCK基因敲减后, HeLa细胞增殖活性及克隆形成能力显著减弱 (P<0.01); 细胞侵袭能力与对照组比较也明显减弱 (P0.05).对于放疗处理组, 未敲减对照组细胞随着放射剂量增加, 细胞活力下降; 而DCK敲减组细胞活力与对照组比较进一步下降 (P<0.01); 对于放射线处理合并DCK敲减处理组, 3-甲基腺嘌呤可导致进步抑制细胞增殖 (P<0.01), 而雷帕霉素可部分逆转DCK敲减导致的细胞增殖抑制 (P<0.01).对HeLa细胞进行低剂量 (2 Gy) 及高剂量 (6 Gy) 放射处理, 对照组细胞LC-Ⅰ/LC-Ⅱ比值相对表达显著下调 (P<0.05), 而DCK敲减组, 无论低剂量 (2 Gy) 及高剂量 (6 Gy) 放射处理, LC-I/LC-II比值都处于较低水平.结论 DCK对宫颈癌细胞增殖及转移起到重要促进作用, 同时敲减DCK后, HeLa细胞对放射敏感性增高.
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