电穿孔法转染人乳腺癌细胞MCF-7的条件优化研究

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通过控制电穿孔时的电压、电脉冲时长、电脉冲次数、质粒浓度和细胞状态等转染条件,将pcDNA3.1(+)-EGFP质粒转入MCF-7细胞,于倒置荧光显微镜下观察EGFP表达情况以检测转染效率,探讨不同电穿孔条件对人乳腺癌MCF-7细胞转染效率的影响,确定MCF-7细胞的最佳电转染条件。结果表明:人乳腺癌细胞MCF-7在电压150 V、质粒浓度1μg/μL左右、脉冲数2次、脉冲时长5 ms、传代时间24 h时可达到较高的电转染率。
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