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目的
探讨细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)对IgA肾病(IgAN)患者血清IgA1刺激诱导人肾小球系膜细胞(HMC)增殖的作用及其可能机制。
方法采用Jacalin亲和层析联合丙烯葡聚糖凝胶S-200凝胶过滤法纯化聚合IgAN患者血清热聚合IgA1(aIgA1)。以腺病毒为载体转染SOCS3至体外培养的HMC,再以aIgA1刺激培养12~48 h,分为空白对照组、IgA1组、IgA1+空载腺病毒组、IgA1+SOCS3腺病毒组。采用噻唑蓝(MTT)法检测系膜细胞增殖情况,Western印迹法和实时定量PCR法检测各组SOCS3、Toll样受体4(TLR4)、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白和mRNA表达水平。
结果aIgA1刺激HMC 24 h后开始表现出促增殖作用,与空白对照组相比,aIgA1刺激后SOCS3、TLR4、TGF-β1蛋白和mRNA表达均有显著升高(P<0.05)。与IgA1组、IgA1+空载腺病毒组相比,IgA1+SOCS3腺病毒组TLR4、TGF-β1蛋白和mRNA表达均显著下降(P<0.05),HMC增殖程度显著降低(P<0.05)。
结论上调SOCS3表达可降低aIgA1刺激后HMC的TLR4和TGF-β1表达水平,并抑制aIgA1诱导的HMC细胞增殖。