检测特异性流行性出血热IgA、IgG抗体捕获ELISA方法的初步建立

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunjava2009
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本文介绍在应用聚合酶链反应(PCR)检测3例肝脏及石蜡切片中的乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)过程中的具体方法、经验和体会;发现冰冻切片应用酚提法;石蜡切片采用水煮法,可以获得较高质量的DNA。在检测PCR产物时,EB胶中电泳和Southern杂交相比,后者具有更高的特异性和敏感性,故对PCR作结论时,应该以Southern杂交的结果为准。两个引物的浓度必须相等,否则会由于不对称扩增而出现双重
期刊
佛波醇二酯(TPA)可提高HSV-2对小乳鼠细胞转化率。转化细胞的确定系根据它在10%小牛血清培养液内能形成转化灶及在含10%胎牛血清培养液内进行筛选。在筛选培养液内,HSV-2加TPA诱导的转化灶均数为单独用HSV-2时的5.33倍。免疫荧光检测发现,27代以前的转化细胞,约10%胞浆内HSV-2抗原阳性;而随传代次数的增加,抗原阳性细胞数逐渐减少。由单个转化灶建立的两个细胞系,一个命名为BL,
我们用cDNA重组技术,构建成四株脊髓灰质炎(下简称脊灰)型间嵌合病毒。本文对其多价抗原性、免疫原性及其他生物学性质进行了研究。结果表明:组建的二株1/2型和二株1/3型脊灰嵌合病毒均具有二价抗原性及免疫原性。病毒生长速度比亲本株慢约10小时,最终病毒滴度可达107.5~8.0TCID50/ml。温度敏感试验与亲本株相似属强毒性质,而蚀斑大小与Mahoney亲本株不同,则相似于Lansing和Le
期刊
采用印迹法(Western Blot)技术对血源性Dane颗粒的抗原性多肽进行了多克隆和单克隆抗体分析。结果表明:①P24P27,P36和P39P42都是S-ORF区的多肽,分别含有S区,S2区和S1区特异性结构位点,多克隆抗体识别提示三者之间存在有 "重复抗原决定簇" ;②多克隆抗HBe和抗HBc均能同P21结合,推测该多肽可能是来自C区的具有e抗原和核心抗原两种抗原位点的多肽;③兔抗Pol能在
用电泳快速析出凝胶中的DNA使之在尼龙膜上印迹,这是Southern转移的一种改良技术,本文用之取代毛细渗吸对32例肝癌组织、33例癌近邻肝组织、7例癌远邻肝组织和29例对照肝组织进行DNA转移和杂交,结果检出整合型HBV DNA者分别为20例、18例、4例和3例,检出游离型HBV DNA者分别为10例、25例、3例和23例。其中有30例肝癌病例为癌灶和癌近邻双份组织配对受测者,其HBV DNA分
本实验采用点杂交技术检测了临床各种标本中人巨细胞病毒(HCMV)DNA相关序列,其阳性率分别为:有异常孕产史孕妇尿标本(9/12)75%,脐血(14/46)30.4%,宫颈炎组织(9/54)16.7%。此法简便,取料方便,周期短,而且较其他法敏感性强,特异性高,可检出lpg同源HCMV DNA,并不与HSV-Ⅱ DNA、pHC79DNA、ssDNA杂交。这对HCMV感染的诊断有一定价值。
期刊
乙型肝炎病毒(HBV)DNA转染的肝癌细胞系(HepG2T8)染色体中有HBV基因整合,能分泌HBsAg和HBeAg。用20u/ml与500μ/ml的r-HuIFN-α1处理细胞48小时,不影响细胞分泌HBsAg和HBeAg。培养液中加入1%抗HBs或10%抗HBe免疫血清,可中和已分泌的HBsAg及HBeAg,但不改变细胞分泌HBsAg和HBeAg的能力。