【摘 要】
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目的 缺乏雌激素会增加绝经后妇女发生动脉粥样硬化(AS)的风险.炎症在AS病理过程中起着至关重要的作用,巨噬细胞与炎症密切相关.梓醇是从传统中药地黄的新鲜根中提取的环烯醚萜苷.本研究旨在评估梓醇对巨噬细胞极化和绝经后AS的影响.方法 在体外,用脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFN-γ)诱导M1巨噬细胞极化,观察梓醇对巨噬细胞经典活化表型的影响.在体内,用高脂肪饮食喂养ApoE-/-小鼠以诱导AS,并进行卵巢切除术以模拟雌激素缺乏.ig给予梓醇90 d后,取小鼠血液和血管.通过Western印迹、PCR、流式
【机 构】
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南京中医药大学药学院,江苏南京 210023;南京中医药大学药学院,江苏南京 210023;南京中医药大学中药药理与安全性评价江苏省重点实验室,江苏南京 210023;南京中医药大学药学院,江苏南京
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目的 缺乏雌激素会增加绝经后妇女发生动脉粥样硬化(AS)的风险.炎症在AS病理过程中起着至关重要的作用,巨噬细胞与炎症密切相关.梓醇是从传统中药地黄的新鲜根中提取的环烯醚萜苷.本研究旨在评估梓醇对巨噬细胞极化和绝经后AS的影响.方法 在体外,用脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFN-γ)诱导M1巨噬细胞极化,观察梓醇对巨噬细胞经典活化表型的影响.在体内,用高脂肪饮食喂养ApoE-/-小鼠以诱导AS,并进行卵巢切除术以模拟雌激素缺乏.ig给予梓醇90 d后,取小鼠血液和血管.通过Western印迹、PCR、流式细胞术和免疫荧光等方法观察梓醇对巨噬细胞生物学功能相关标志物和表型转换标志物的影响,以及对雌激素受体表达的影响.同时借助于试剂盒检测梓醇对炎症因子、细胞因子和氧化应激反应相关指标的影响.用ERα和ERβ特异性阻断剂及shRNA干扰雌激素受体表达,以验证梓醇是否通过调节雌激素受体起作用.结果 梓醇可以抑制LPS和INF-γ诱导的M1巨噬细胞极化,抑制巨噬细胞M1表型中的促炎反应和氧化应激反应.在体内,梓醇消除绝经后AS小鼠脂质积累,改善血管病变,降低血管钙化程度、斑块面积和纤维帽,明显减缓AS病变进程.梓醇可以上调ERα和ERβ的表达.阻断ERα后,梓醇抗巨噬细胞M1表型的效果降低,抗炎抗氧化应激反应的作用也显著下调,而阻断ERβ对梓醇的抗炎抗氧化应激作用没有显著的影响.结论 梓醇可通过增加ERα的表达,抑制巨噬细胞极化,从而预防绝经后AS的发生.
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