【摘 要】
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目的 探讨盐酸高乌甲素对人宫颈癌Hela细胞体外增殖的抑制作用及其可能作用机制.方法 采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(5-eth
【机 构】
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西北师范大学生命科学学院,兰州730070;甘肃特色植物有效成分制品工程技术研究中心,兰州730070;中国人民解放军联勤保障部队第九四○医院医学实验中心,兰州730050
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目的 探讨盐酸高乌甲素对人宫颈癌Hela细胞体外增殖的抑制作用及其可能作用机制.方法 采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)细胞增殖试剂盒法考察盐酸高乌甲素对Hela细胞的增殖抑制作用;4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色法研究其对Hela细胞核形态的影响;运用流式细胞技术,采用碘化丙啶(propidium iodide,PI)单标记法和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(annexin V-fluorescein isothiocyanate/propidium iodide,Annexin V-FITC/PI)双标记法检测盐酸高乌甲素作用后Hela细胞的细胞周期分布情况及细胞凋亡情况;Western blotting检测盐酸高乌甲素对Hela细胞p53、p21、p16、Cyclin D1、Rb和p-Rb蛋白表达的影响.结果 盐酸高乌甲素对人宫颈癌Hela细胞的增殖具有抑制作用,且这种抑制作用具有明显的量效关系(r=0.999 3,P＜0.01),其对Hela细胞的IC50为0.772 6 mg·mL-1.经盐酸高乌甲素作用后,Hela细胞的细胞核皱缩,并有变形和碎裂的现象,出现了明显的G0/G1期阻滞,且细胞凋亡率随盐酸高乌甲素浓度的增大而逐渐升高.盐酸高乌甲素能上调Hela细胞p53、p16和Rb的蛋白表达,下调Cyclin D1和p-Rb的蛋白表达,但对p21的表达无显著影响.结论 盐酸高乌甲素可能通过pRb通路介导Hela细胞发生G0/G1期阻滞,抑制Hela细胞的增殖,促进凋亡.
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