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目的
检测一种新的以头颈肿瘤细胞表面受体为靶向的多肽基因导入系统对人喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)的基因导入效果.
方法链霉亲和素标记生物素(labeled streptavidin biotin,LSAB)法检测喉癌组织标本和培养的Hep2喉癌细胞表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)的表达.建立人喉癌裸鼠移植瘤模型,分别构建绿色荧光蛋白标记基因和多肽载体系统、半乳糖苷酶报告基因和多肽载体系统四元复合物,分别进行报告基因和标记基因的体内外导入实验.
结果EGFR在65%(15/23)喉癌组织标本呈阳性表达.Hep2细胞的EGFR亦呈阳性表达.EGFR主要位于细胞膜,部分位于细胞质内.绿色荧光蛋白基因转染Hep2后 48 h显微镜下可见荧光,72 h达高峰,导入率大于80%(78/97).β-半乳糖苷酶报告基因荷人喉癌裸鼠移植瘤瘤内转染12 h即表达蓝染,24 h蓝染程度加深,72 h仍有表达.
结论EGFR广泛存在于人喉癌细胞,新的多肽基因导入系统借助于EGFR可靶向性将报告或标记基因导入体内外人喉癌细胞,并得到高效表达,为头颈鳞癌的基因治疗提供了一个新的靶向高效的基因导入系统.