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摘要：目前珍稀野生动物血液等组织资源并没有得到很好的收集和保护，很大程度上，野生动物资源正处于大量的浪费中。
关键词：野生动物样品；采集保存；组织库；管理
中图分类号：S8589文献标识码：A
为文本通讯作者1引言
成都动物园是西南地区最大的珍稀野生动物遗传、分子生物学等科技研究基地，在珍惜野生动物组织资源样品采集、保存以及管理并不规范和系统，野生动物资源保护做得并不好，为了保存珍稀野生动物资源，建立了珍稀野生动物资源组织库，通过对野生动物的血液、组织等样本的收集、保存和研究，对其进行科学的管理和控制，为我园这个珍稀野生动物遗传、分子生物学等科技研究基地提供充足的材料支持，对今后我园的珍稀野生动物生物遗传、分子生物学科技研究提供了先决条件和巡航保证。
2材料与方法
21时间、地点、材料及设备
于2009年12月～2011年12月在成都动物园完成；成都动物园内，各类珍稀野生动物；液氮罐2个，容量管若干。
22方法
221液氮保存与管理
与传统的血液、细胞组织冰箱冷冻保存有所不同，此方法用超低温的液氮保存的方式，液氮的温度大概为零下190℃左右，这可以让保存的样品迅速的达到冷冻温度，更有效保存样品质量，同时有效延长了样品所保存的时间，提高遗传、分子生物学科研提取的纯度及成功率。方法由以下几点：
2211采样取组织样品
（1）活体在珍稀动物安全保定状态下进行，部位没有太多要求，皮肤、受伤部位组织等均可。采后装于冷冻管中并立即放在液氮中。
（2）死亡动物（最好为国家一、二级保护动物）。采取主要部位包括肝脏、心、肌肉、肾等，装于冷冻管中，然后储存于液氮罐中。
2212样品保存
（1）负责将样品逐个编号、分类，保存于液氮罐中，并在液氮罐中每个挂钩上标明编号位置，以便以后查找。
（2）编辑成都动物园野生动物细胞与组织材料，保存样品电子表格，并将每次成功采集到的样品逐个填入电子表格，保存于电脑中。
（3）编辑成都动物园野生动物细胞与组织材料保存样品手写表格，做到每次采集后都登记，与电脑中的电子表格对应无误。
（4）负责每月分段5～6次的检查液氮的挥发状况，并及时联系液氮厂商添加液氮，保证样品不被损坏。
（5）检查冷冻管和配套器具的库存数量，若出现不足时，及时联系相关厂商购买补缺。
222福尔马林溶液保存与管理
福尔马林的使用涵盖之层面其实相当广泛，其中因甲醛能与蛋白质的氨基结合，使蛋白质凝固，因此在医药上可做为检验时的组织固定剂等。本项目就根据福尔马林的这一特性，对珍稀野生动物组织样品进行固定保存，极大程度地缓解了液氮保存样品数量有限，样品浪费较大的弊端。方法由以下几点开展工作：
2221取组织样品
（1）活体对从生病动物身上取下的病理组织，将其放入容量管中，加入福尔马林固定，放入样品柜的试管架中。
（2）死亡动物，采取主要部位包括肝脏、心脏、肺脏、肾脏、脾脏等，放入容量管中，加入福尔马林固定，放入样品柜的试管架中。每次多采集一份组织，装入塑料封口袋中，加入福尔马林固定，做病理切片备用。
2222样品保存
（1）负责将样品逐个编号、分类，保存于样品柜中，容量管上标明该管中保存的样品名称，以便今后使用。
（2）编辑成都动物园野生动物细胞与组织材料保存样品电子表格，并将每次成功采集到的样品逐个填入电子表格，保存于电脑中。
（3）编辑成都动物园野生动物细胞与组织材料保存样品手写表格，做到每次采集后都登记，与电脑中的电子表格对应无误。
（4）购买相应的保存配套设施与器具，确保保存管理工作的顺利进行。
3结果
31收集保存样品数量
在这两年时间内基本制定了采样的基本步骤，操作规程，每次采集样品的数量，定为2～3个为最佳。共采集到液氮保存珍稀野生动物血液组织样品总数1 024个，其中血液样品353个，组织样品671个；福尔马林保存样品394个，两种组织样品保存方法共保存样品达1 428个，并且现在已经合理有序的管理起来。
32肝癌组织库管理方法的建立及运作
样品库一共提取液氮保存样品次数4次，共计样品个数16个，其中血液样品10个，其它组织样品6个；提取福尔马林保存样品1次，共计样品个数3个，各样品提取时间和提取人均记录于及EXCEL2003软件样品库一览表中，整个野生动物血液等组织样品保存管理方法的应用基本建立，并运作良好，对未来的动物样品采集管理具有较强的可持续性。
4讨论
成都动物园长期以来珍稀野生动物血液等组织资源并没有得到很好的收集和保护，很大程度上，野生动物资源正处于大量的浪费中，造成我园珍稀野生动物遗传、分子生物学等领域的科技研究过程中因样品材料不足，而导致科研无法进行。
珍稀野生动物血液等组织采集与管理方法以及数据库的建立具有重要意义，建库的目的是采集、保存珍稀野生动物的组织和血液标本，并对其进行科学的管理和控制，一方面对珍稀野生动物物种得以记录、保存，同时可向我园广大科研工作者提供组织标本，满足科研项目的需求，最终对野生动物的保护工作作出贡献。
参考文献
[1]万涛，周宁新，黄志强.胆管癌新鲜组织标本库建立与鉴定[J].中国普外基础与临床杂志，2005，12（04）：329-332.
[2]叶铁真，郑锦涛，张晓红，等.儿童肿瘤标本库标本信息管理系统的建立和应用[J].中国小儿血液，2003，8（04）：183-185.
[3]李莉华，魏福祥，王丰，等.肿瘤库（用于分子生物学研究）的建立及管理[J].肿瘤，2004，24（06）：578-580.
[4]陈伟，林叶，侯宝华，等.规范化网络信息系统支持的肝癌标本库建立探讨[J].实用医学杂志，2007，23（06）：826-827.
[5]季加孚.北京大学临床肿瘤学院标本库的建设[J].北京大学学报（医学版），2005，37（03）：329-330.
作者简介：陈维刚（1977-），男，四川成都人，大学，兽医师，研究方向：野生动物疾病防治工作。屈羽，助理野保工程师，为同等贡献的第1作者。
关键词：野生动物样品；采集保存；组织库；管理
中图分类号：S8589文献标识码：A
为文本通讯作者1引言
成都动物园是西南地区最大的珍稀野生动物遗传、分子生物学等科技研究基地，在珍惜野生动物组织资源样品采集、保存以及管理并不规范和系统，野生动物资源保护做得并不好，为了保存珍稀野生动物资源，建立了珍稀野生动物资源组织库，通过对野生动物的血液、组织等样本的收集、保存和研究，对其进行科学的管理和控制，为我园这个珍稀野生动物遗传、分子生物学等科技研究基地提供充足的材料支持，对今后我园的珍稀野生动物生物遗传、分子生物学科技研究提供了先决条件和巡航保证。
2材料与方法
21时间、地点、材料及设备
于2009年12月～2011年12月在成都动物园完成；成都动物园内，各类珍稀野生动物；液氮罐2个，容量管若干。
22方法
221液氮保存与管理
与传统的血液、细胞组织冰箱冷冻保存有所不同，此方法用超低温的液氮保存的方式，液氮的温度大概为零下190℃左右，这可以让保存的样品迅速的达到冷冻温度，更有效保存样品质量，同时有效延长了样品所保存的时间，提高遗传、分子生物学科研提取的纯度及成功率。方法由以下几点：
2211采样取组织样品
（1）活体在珍稀动物安全保定状态下进行，部位没有太多要求，皮肤、受伤部位组织等均可。采后装于冷冻管中并立即放在液氮中。
（2）死亡动物（最好为国家一、二级保护动物）。采取主要部位包括肝脏、心、肌肉、肾等，装于冷冻管中，然后储存于液氮罐中。
2212样品保存
（1）负责将样品逐个编号、分类，保存于液氮罐中，并在液氮罐中每个挂钩上标明编号位置，以便以后查找。
（2）编辑成都动物园野生动物细胞与组织材料，保存样品电子表格，并将每次成功采集到的样品逐个填入电子表格，保存于电脑中。
（3）编辑成都动物园野生动物细胞与组织材料保存样品手写表格，做到每次采集后都登记，与电脑中的电子表格对应无误。
（4）负责每月分段5～6次的检查液氮的挥发状况，并及时联系液氮厂商添加液氮，保证样品不被损坏。
（5）检查冷冻管和配套器具的库存数量，若出现不足时，及时联系相关厂商购买补缺。
222福尔马林溶液保存与管理
福尔马林的使用涵盖之层面其实相当广泛，其中因甲醛能与蛋白质的氨基结合，使蛋白质凝固，因此在医药上可做为检验时的组织固定剂等。本项目就根据福尔马林的这一特性，对珍稀野生动物组织样品进行固定保存，极大程度地缓解了液氮保存样品数量有限，样品浪费较大的弊端。方法由以下几点开展工作：
2221取组织样品
（1）活体对从生病动物身上取下的病理组织，将其放入容量管中，加入福尔马林固定，放入样品柜的试管架中。
（2）死亡动物，采取主要部位包括肝脏、心脏、肺脏、肾脏、脾脏等，放入容量管中，加入福尔马林固定，放入样品柜的试管架中。每次多采集一份组织，装入塑料封口袋中，加入福尔马林固定，做病理切片备用。
2222样品保存
（1）负责将样品逐个编号、分类，保存于样品柜中，容量管上标明该管中保存的样品名称，以便今后使用。
（2）编辑成都动物园野生动物细胞与组织材料保存样品电子表格，并将每次成功采集到的样品逐个填入电子表格，保存于电脑中。
（3）编辑成都动物园野生动物细胞与组织材料保存样品手写表格，做到每次采集后都登记，与电脑中的电子表格对应无误。
（4）购买相应的保存配套设施与器具，确保保存管理工作的顺利进行。
3结果
31收集保存样品数量
在这两年时间内基本制定了采样的基本步骤，操作规程，每次采集样品的数量，定为2～3个为最佳。共采集到液氮保存珍稀野生动物血液组织样品总数1 024个，其中血液样品353个，组织样品671个；福尔马林保存样品394个，两种组织样品保存方法共保存样品达1 428个，并且现在已经合理有序的管理起来。
32肝癌组织库管理方法的建立及运作
样品库一共提取液氮保存样品次数4次，共计样品个数16个，其中血液样品10个，其它组织样品6个；提取福尔马林保存样品1次，共计样品个数3个，各样品提取时间和提取人均记录于及EXCEL2003软件样品库一览表中，整个野生动物血液等组织样品保存管理方法的应用基本建立，并运作良好，对未来的动物样品采集管理具有较强的可持续性。
4讨论
成都动物园长期以来珍稀野生动物血液等组织资源并没有得到很好的收集和保护，很大程度上，野生动物资源正处于大量的浪费中，造成我园珍稀野生动物遗传、分子生物学等领域的科技研究过程中因样品材料不足，而导致科研无法进行。
珍稀野生动物血液等组织采集与管理方法以及数据库的建立具有重要意义，建库的目的是采集、保存珍稀野生动物的组织和血液标本，并对其进行科学的管理和控制，一方面对珍稀野生动物物种得以记录、保存，同时可向我园广大科研工作者提供组织标本，满足科研项目的需求，最终对野生动物的保护工作作出贡献。
参考文献
[1]万涛，周宁新，黄志强.胆管癌新鲜组织标本库建立与鉴定[J].中国普外基础与临床杂志，2005，12（04）：329-332.
[2]叶铁真，郑锦涛，张晓红，等.儿童肿瘤标本库标本信息管理系统的建立和应用[J].中国小儿血液，2003，8（04）：183-185.
[3]李莉华，魏福祥，王丰，等.肿瘤库（用于分子生物学研究）的建立及管理[J].肿瘤，2004，24（06）：578-580.
[4]陈伟，林叶，侯宝华，等.规范化网络信息系统支持的肝癌标本库建立探讨[J].实用医学杂志，2007，23（06）：826-827.
[5]季加孚.北京大学临床肿瘤学院标本库的建设[J].北京大学学报（医学版），2005，37（03）：329-330.
作者简介：陈维刚（1977-），男，四川成都人，大学，兽医师，研究方向：野生动物疾病防治工作。屈羽，助理野保工程师，为同等贡献的第1作者。