人4-1BBL胞外区/抗CD20 Fab'融合蛋白的构建和表达

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研究共刺激分子4-1BBL在肿瘤靶向治疗方面的作用,用PCR和overlap PCR方法构建人4-1BBL胞外区,抗CD20 Fab’融合蛋白表达载体,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用SDS-PAGE和HPLC鉴定纯化产物;采用玫瑰花环试验鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA序列测定结果表明:人4-1BBL胞外区/抗CD20Fab’融合蛋白已构建成功。表达可溶性产物的产量达200μg/L以上,纯度较高,具有与激活的Jurkat(4-1BBL^+)和Raji细胞(CD20^+
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