【摘 要】
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目的:建立在小鼠心肌细胞中特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠.方法:构建了心肌细胞特异性表达Cre重组酶的转基因载体.该载体通过显微注射被导入小鼠受精卵中,通过胚胎移植,获
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071
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目的:建立在小鼠心肌细胞中特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠.方法:构建了心肌细胞特异性表达Cre重组酶的转基因载体.该载体通过显微注射被导入小鼠受精卵中,通过胚胎移植,获得转基因首建者小鼠.利用PCR检测子代小鼠Cre重组酶整合情况.通过Northern 杂交检测Cre重组酶表达的组织特异性.结果:构建了含有心肌细胞特异性α-肌球蛋白重链(α-MHC)启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体α-MHC-Cre-hGH.将转基因载体进行显微注射,共注射了215枚小鼠受精卵,其中202枚移植入13只假孕母鼠的输卵管中发育,获得子代小鼠42只.PCR检测发现有1只小鼠在其基因组上整合有Cre重组酶基因.Northern杂交检测结果显示该转基因小鼠只在心脏组织中特异性地表达Cre重组酶基因.结论:成功获得了在小鼠心肌细胞中特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠,为利用条件基因打靶技术研究基因在心脏发育与相关疾病中的功能提供了有利的工具.
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