【摘 要】
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[目的]建立TaqMan探针定量PCR技术检测血浆游离DNA的方法。[方法]构建重组质粒pMD-18-T-GAPDH、pMD-18-T-SRY作为标准品,并通过软件设计出TaqMan探针,优化定量PCR体系,并对其
【机 构】
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四川大学生命科学学院医学遗传研究所; 四川省产品质量监督检验检测院; 四川省妇幼保健院;
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[目的]建立TaqMan探针定量PCR技术检测血浆游离DNA的方法。[方法]构建重组质粒pMD-18-T-GAPDH、pMD-18-T-SRY作为标准品,并通过软件设计出TaqMan探针,优化定量PCR体系,并对其特异性进行分析。[结果]建立了1个检测GAPDH和4个检测SRY的荧光定量PCR方法,得到上述5个荧光PCR的扩增动力曲线和定量标准曲线,模板起始浓度与阈值循环数(CT值)之间有很好的相关关系(r分别为0.97、0.99、0.98、0.97、0.99)。[结论]成功建立了定量检测血浆游离DNA的方法,其灵敏度高、特异性强,有望成为一种检测孕母血浆游离DNA含量的快速简便方法。
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