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竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)是临床实验室检测免疫学指标的常用手段之一,但在实际操作过程中,待测样品和酶结合物是以先后顺序加入的,这就导致待测样品与酶结合物在竞争结合包被于固相上的抗原或抗体时存在"不公平"的竞争现象.本文以竞争法ELISA检测抗-HBc总抗体为例,对加样顺序在竞争法ELISA中的影响因素进行了实验评价,并提出了相应的对策.