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目的：研究茜草提取物体内抗肿瘤作用，为新型抗肿瘤中药的开发提供理论依据和实验基础。
方法：用茜草提取物灌胃观察其对S180荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用;采用生命延长率实验方法，用茜草提取物灌胃观察其对S180荷瘤小鼠的生命延长作用。采用血清药理学实验方法，观察含药血清体外对人肝癌HepG2细胞株抗增殖作用。结果：（1）茜草提取物小、中、大剂量组对小鼠移植性肉瘤S180实体瘤有显著的抑制作用（与模型组比较，中剂量组P<0.05，大剂量组P<0.01）;（2）生命延长率实验结果小剂量及中剂量组均有很好的延长作用，与对照组相比P<0.05。结论：茜草提取物对S180小鼠具有延长生命的作用。茜草提取物对小鼠移植性S180肉瘤具有抑制作用。（3）血清药理学实验结果，终浓度分别为10%、20%、25%的灭活的含药大白鼠血清对HepG2细胞株有很好的抑制增殖作用，对照组相比P<0.05。
关键词：抑瘤率;毒性实验;血清药理学
目前国内茜草提取物对恶性肿瘤的研究尚少。虽然新辅助化疗以及靶向药物正在研究当中，但是患者的5年生存率仍然很低。因此，我们需要寻找一种新的更有效的抗肿瘤药物，增强治疗疗效，改善患者的生活质量，延长患者的生存时间。
1材料与方法
1.1材料
（1）PBS缓冲液（pH：7.2-7.4）：购于北京中杉金桥生物技术有限公司
（2）枸橼酸缓冲液（pH：6.0）：购于北京中杉金桥生物技术有限公司
（3）电子天平：天津市天平仪器有限公司 MP 200A型
1.2方法
体内抑瘤实验
取72只雄性昆明小鼠[1]，无菌条件下取接种S180 7天的小鼠腹水，用0.9%生理盐水以1：3稀释至含瘤细胞1×106/ml，在每只右腋下接种0.2ml，次日将小鼠随机分6组（每组12只）并称重：1组为生理盐水（荷瘤模型对照）组，灌服生理盐水;2组为阳性对照组，腹腔注射环磷酰胺（CTX）0.02g/kg/日;3、4、5组为茜草提取物小、中、大剂量给药组（剂量分别为0.66g/kg/d、1.32g/kg/d、2.64g/kg/d生药），给药组1次/日灌胃，连续给药10天;6组为空白对照组，不接种瘤细胞、不附加任何刺激。实验期间让动物自由进食水。第11天称重，眼眶静脉无菌采血后拉颈处死，取瘤块称重，按照下列公式计算抑瘤率[2，3]。
抑瘤率（%）=（对照组瘤重-实验组瘤重）/对照组瘤重×100%
S180肉瘤生命延长率实验
取50只雄性昆明种小鼠，无菌条件下取接种S180 7天的小鼠腹水，用0.9%生理盐水以1：3稀释至含瘤细胞1×106/ml，在每只鼠左下腹腔注射0.2ml，次日将小鼠随机分5组（每组10只）并称重：1组为生理盐水（荷瘤模型对照）组，灌服生理盐水;2组为阳性对照组，腹腔注射羟基喜树碱（HCPT）0.001g/kg/日;3、4、5组分为茜草提取物小、中、大剂量给药组（剂量分别为0.66g/kg/d、1.32g/kg/d、2.64g/kg/d生药），给药组1次/日灌胃，连续给药10天，并连续观察一个月，记录动物死亡时间。
生命延长率（%）=（实验组平均存活天数/对照组平均存活天数-1）×100%
血清药理学实验：
本实验制备2组实验血清，即无药血清组和茜草提取物含药血清组。每组取大鼠4只，雌雄各半。实验前禁食不禁水18小时。取茜草提取物1.1g/kg/d（生药），每日分上午和下午2次灌胃，连续2日;无药血清组灌服等容积生理盐水。末次给药2h后乙醚麻醉，眼眶静脉无菌采血后拉颈处死。收集的全血2500rpm离心15min，取血清，合并同组血清后，经56℃水浴，30min灭活，放入-20℃冰箱中保存，两周内使用。通过MTT方法检测含药血清对人肝癌HepG2细胞株抗增殖作用。
2统计学处理
应用SPSS13.0软件：统计分析采用t检验的进行统计学处理。
3.结果
3.1茜草提取物对小鼠S180实体瘤的抑瘤作用
茜草提取物对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用结果如下：
表1茜草提取物对S180肉瘤的抑制作用
对照组相比较，*P<0.05，﹡﹡P<0.01
3.2茜草提取物对H22荷瘤小鼠生命延长率的影响
茜草提取物对H22荷瘤小鼠作用后生命延长率的结果如下：
表2 茜草提取物对S180小鼠生命延长率的影响
与生理盐水组比较*P<0.05，﹡﹡P<0.01
表3 茜草含药血清对肝癌HepG2細胞株的抑制作用
3讨论
中药血清药理学研究方法是将动物灌服中药或复方制剂后，在一定时间内采集其血清液，分离血清以进行体外药理的实验方法。它模拟了药物与机体相互作用的过程，在一定程度上揭示中药在胃肠代谢过程中活性成份的转化和改变，有助于中药真正有效活性部位和有效成份的发现。
本次实验结果表明，茜草治疗组荷S180肉瘤小鼠一般情况改善，肿瘤结节明显小于肿瘤模型（生理盐水）组。茜草对小鼠S180肉瘤抑瘤率在中、大剂量组中均有较好的抑制率，说明茜草对S180肉瘤有较强的抑瘤作用;生命延长率实验结果显示茜草大、中剂量组对S180小鼠均起到很好的生命延长作用，统计学检验P<0.05。小结：茜草提取物对S180荷瘤小鼠具有生命延长作用，对HepG2有很好的抑制作用。
参考文献：
[1]黄黧，邢邯英等.牛黄天龙胶囊的体内抗肿瘤作用研究.河北医药，2013，35（8）1246-1249
[2]李仪奎主编.中药药理实验方法学.第1版.上海科学技术出版社1991，69-71
[3]徐叔云，卞如濂，陈修主编.药理实验方法学.第2版.北京：人民卫生出版社，1992.1423—1440
方法：用茜草提取物灌胃观察其对S180荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用;采用生命延长率实验方法，用茜草提取物灌胃观察其对S180荷瘤小鼠的生命延长作用。采用血清药理学实验方法，观察含药血清体外对人肝癌HepG2细胞株抗增殖作用。结果：（1）茜草提取物小、中、大剂量组对小鼠移植性肉瘤S180实体瘤有显著的抑制作用（与模型组比较，中剂量组P<0.05，大剂量组P<0.01）;（2）生命延长率实验结果小剂量及中剂量组均有很好的延长作用，与对照组相比P<0.05。结论：茜草提取物对S180小鼠具有延长生命的作用。茜草提取物对小鼠移植性S180肉瘤具有抑制作用。（3）血清药理学实验结果，终浓度分别为10%、20%、25%的灭活的含药大白鼠血清对HepG2细胞株有很好的抑制增殖作用，对照组相比P<0.05。
关键词：抑瘤率;毒性实验;血清药理学
目前国内茜草提取物对恶性肿瘤的研究尚少。虽然新辅助化疗以及靶向药物正在研究当中，但是患者的5年生存率仍然很低。因此，我们需要寻找一种新的更有效的抗肿瘤药物，增强治疗疗效，改善患者的生活质量，延长患者的生存时间。
1材料与方法
1.1材料
（1）PBS缓冲液（pH：7.2-7.4）：购于北京中杉金桥生物技术有限公司
（2）枸橼酸缓冲液（pH：6.0）：购于北京中杉金桥生物技术有限公司
（3）电子天平：天津市天平仪器有限公司 MP 200A型
1.2方法
体内抑瘤实验
取72只雄性昆明小鼠[1]，无菌条件下取接种S180 7天的小鼠腹水，用0.9%生理盐水以1：3稀释至含瘤细胞1×106/ml，在每只右腋下接种0.2ml，次日将小鼠随机分6组（每组12只）并称重：1组为生理盐水（荷瘤模型对照）组，灌服生理盐水;2组为阳性对照组，腹腔注射环磷酰胺（CTX）0.02g/kg/日;3、4、5组为茜草提取物小、中、大剂量给药组（剂量分别为0.66g/kg/d、1.32g/kg/d、2.64g/kg/d生药），给药组1次/日灌胃，连续给药10天;6组为空白对照组，不接种瘤细胞、不附加任何刺激。实验期间让动物自由进食水。第11天称重，眼眶静脉无菌采血后拉颈处死，取瘤块称重，按照下列公式计算抑瘤率[2，3]。
抑瘤率（%）=（对照组瘤重-实验组瘤重）/对照组瘤重×100%
S180肉瘤生命延长率实验
取50只雄性昆明种小鼠，无菌条件下取接种S180 7天的小鼠腹水，用0.9%生理盐水以1：3稀释至含瘤细胞1×106/ml，在每只鼠左下腹腔注射0.2ml，次日将小鼠随机分5组（每组10只）并称重：1组为生理盐水（荷瘤模型对照）组，灌服生理盐水;2组为阳性对照组，腹腔注射羟基喜树碱（HCPT）0.001g/kg/日;3、4、5组分为茜草提取物小、中、大剂量给药组（剂量分别为0.66g/kg/d、1.32g/kg/d、2.64g/kg/d生药），给药组1次/日灌胃，连续给药10天，并连续观察一个月，记录动物死亡时间。
生命延长率（%）=（实验组平均存活天数/对照组平均存活天数-1）×100%
血清药理学实验：
本实验制备2组实验血清，即无药血清组和茜草提取物含药血清组。每组取大鼠4只，雌雄各半。实验前禁食不禁水18小时。取茜草提取物1.1g/kg/d（生药），每日分上午和下午2次灌胃，连续2日;无药血清组灌服等容积生理盐水。末次给药2h后乙醚麻醉，眼眶静脉无菌采血后拉颈处死。收集的全血2500rpm离心15min，取血清，合并同组血清后，经56℃水浴，30min灭活，放入-20℃冰箱中保存，两周内使用。通过MTT方法检测含药血清对人肝癌HepG2细胞株抗增殖作用。
2统计学处理
应用SPSS13.0软件：统计分析采用t检验的进行统计学处理。
3.结果
3.1茜草提取物对小鼠S180实体瘤的抑瘤作用
茜草提取物对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用结果如下：
表1茜草提取物对S180肉瘤的抑制作用
对照组相比较，*P<0.05，﹡﹡P<0.01
3.2茜草提取物对H22荷瘤小鼠生命延长率的影响
茜草提取物对H22荷瘤小鼠作用后生命延长率的结果如下：
表2 茜草提取物对S180小鼠生命延长率的影响
与生理盐水组比较*P<0.05，﹡﹡P<0.01
表3 茜草含药血清对肝癌HepG2細胞株的抑制作用
3讨论
中药血清药理学研究方法是将动物灌服中药或复方制剂后，在一定时间内采集其血清液，分离血清以进行体外药理的实验方法。它模拟了药物与机体相互作用的过程，在一定程度上揭示中药在胃肠代谢过程中活性成份的转化和改变，有助于中药真正有效活性部位和有效成份的发现。
本次实验结果表明，茜草治疗组荷S180肉瘤小鼠一般情况改善，肿瘤结节明显小于肿瘤模型（生理盐水）组。茜草对小鼠S180肉瘤抑瘤率在中、大剂量组中均有较好的抑制率，说明茜草对S180肉瘤有较强的抑瘤作用;生命延长率实验结果显示茜草大、中剂量组对S180小鼠均起到很好的生命延长作用，统计学检验P<0.05。小结：茜草提取物对S180荷瘤小鼠具有生命延长作用，对HepG2有很好的抑制作用。
参考文献：
[1]黄黧，邢邯英等.牛黄天龙胶囊的体内抗肿瘤作用研究.河北医药，2013，35（8）1246-1249
[2]李仪奎主编.中药药理实验方法学.第1版.上海科学技术出版社1991，69-71
[3]徐叔云，卞如濂，陈修主编.药理实验方法学.第2版.北京：人民卫生出版社，1992.1423—1440