标本误差因素对血液生化检验结果的影响

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  临床化学检验质量控制始终贯穿于分析前、分析中和分析后等环节[1],尤其生化检验室前质控是整个分析过程的先决条件和保证。标本误差系指被检标本在取送及保存过程中引入的误差,这类误差在标本正式检验之前即已存在。就影响血液生化检验质量的标本误差因素结合临床的具体情况,做以下分析。
  
  医护与标本误差因素的关系
  生化血液标本测定的准确性受许多因素影响,正确的采集时间、止血带压迫时间、姿势、部位、采血量及标本溶血、送检时间送检标本等是获得可靠结果的前提。但实际工作中患者血标本的采集往往由护士负责操作,血液标本多由医护人员取送,环节多,时间长,部分医护人员对标本误差因素的认识不足,造成分析标本前潜在的对实验结果的影响因素,这将给疾病的诊断带来错误的判断。
  
  标本的采集
  采血时间和姿势:血液标本的采血时间一般都是于清晨早餐前或进食12小时后抽血。这是因为进食后的不同时间内,血液中的某些化学成分有较大波动,另一方面,受试者的空腹时间不应超过16小时,否则白蛋白、补体C3、运铁蛋白、血糖含量下降及血胆红素上升。其因素有,体位、进食、昼夜等。餐后的血液化学成分的变化取决于饮食量和性质,一般血糖、钾、铁、甘油三酯(TG)、碱性磷酸酶的浓度或活性增高,饮酒后立即影响使乳酸、尿酸和乙醇代谢产物(乙醛、乙酸)增加。人体从平卧状态转为直立状态15分钟内,静脉血中血浆蛋白及某些与血浆蛋白结合的成分浓度可增高10%~13%,这是由于细胞外液的重新分布所致[2]
  采血部位和止血带压迫时间:生化血液标本通常抽取肘前静脉、腕背静脉血,小儿和新生儿有时选取颈静脉和前囟静脉血,做血气分析时常选取股动脉、肱动脉和桡动脉,对于婴儿,也可从头皮动脉采血,24~48小时的新生儿,可以从脐动脉采血,采血后应立即使动脉血与空气隔离,阻止血气交换。血液标本多由静脉采集,止血带压迫时间,如用1分钟血浆白蛋白可增加6%,用止血带3分钟后可使胆红素、胆固醇、部分酶如转氨酶均会增加>5%。
  血标本的送检时间:血标本放置时间过久导致某些生化成分改变。如白细胞降解作用和红细胞消耗能量及细菌污染而分解葡萄糖,使血糖浓度降低。红细胞中的K+ 逸入血清使血清K+ 升高;CO2逸散使其结果降低;血液pH值变化;酶活性降低或丧失等。如果血样同时还有微生物的严重污染及气温较高等情况存在时,上述变化及其影响更为复杂。血气分析的血样要求从采血到检测完毕的全过程必须在15分钟内完成,同时要求在严格隔绝空气的条件下进行血样抽取、递送和检测。
  
  抗凝剂的影响
  用于生化检验的抗凝剂很多,抗凝机理也不同,因此要根据不同的检验项目选择适当的抗凝剂。如草酸钾不能用于酸碱平衡的观察,不能用于钾、钙的测定。草酸钾和氟化钠抗凝剂对许多酶活性有抑制作用,故不适于酶的测定,如淀粉酶、转氨酶、磷酸酶等,对酶法测定胆固醇和脲酶法测定尿素氮也有干扰。
  
  标本状态的影响
  溶血标本:不良的采血习惯和传统采血器具的限制会造成溶血[3]。溶血的干扰机理:①血细胞中高浓度组分逸出,使结果增高,血细胞内浓度比血浆中浓度明显高的物质有LDH、ACP、AST、K+ ,轻微溶血就可以对这些项目产生很大影响。另外,若某些物质的血细胞内浓度低于血清浓度时,则溶血相当于血清被稀释,因而使这些血清成分特别是发生重度溶血时的检测值降低,其主要有Ca2+、Na+ 、Cl- 、UA等。②血细胞成分进入血清中后因化学反应而引起其他物质的浓度改变,如溶血后红细胞的磷脂进入血清被血清中的磷酸酯酶水解,其结果造成血清无机磷浓度显著增高。③血红蛋白本身颜色对检测的光学干扰,血红蛋白的颜色在431nm和555nm波长附近能使比色、比浊法的吸光度增高,如溶血引起重氮单试剂法胆红素测定结果明显升高。因此,严控标本溶血是保证检验质量的重要方面。
  黄疸标本:胆红素对反应结果产生黄色化合物的比色分析影响很大,一般可以用样本空白或两点比色法、连续监测法来消除胆红素对黄色结果的影响,但由于胆红素不稳定,随着胆红素被氧化为胆绿素、胆褐素而变色,此时如果使用两点法、连续监测法同样也不能排除胆红素对结果的干扰。此外胆红素作为一种还原剂对氧化反应有干扰,如氧化酶法测定GLU、TG、UA、胆固醇等,因为胆红素可以与上述过程中H2O2分解产生的新生态氧发生反应,从而使新生态氧与氧化酶法反应中的色源物质结合减少,导致结果偏低。对于黄胆血清标本,主要是导致血磷,高密度脂蛋白结果明显偏低,主要是黄胆可干扰这些物质的测定反应。因此遇到这类血清标本应在审核时。
  脂血标本:在生化检测时遇到直接胆红素较高总胆红素或低密度脂蛋白呈负值时,应查看标本是否是脂血,如果是说明此患者有脂代谢紊乱,结果仅供参考。血液脂浊可散射光线,所以对吸光度一般产生正向干扰,导致某些项目如ALB、UA、总蛋白(TP)等测定结果偏高,此时即使使用两点法或连续监测法不能排除脂血干擾。而在pH>10的环境中,乳糜中的TG会皂化可使血清逐渐变清,使许多比色法测定如Ca2+、Cr、ALP、TP等结果产生负误差,此时可以用双波长法或设计样本空白消除干扰。在某些实验室用乙醚处理脂血以消除脂浊对生化检验结果的影响,但是乙醚处理的脂浊标本虽然可以排除脂浊对ALT、AST、TP等指标的干扰,不能排除对ALB、GGT、LDH、BUN、GLU、Ca2+等指标的干扰。
  总之,准确的结果来源于合格的标本,加强医护与检验科的交流是提高检验医学水平的重要环节,从而使医学检验能更好地发挥其临床诊治和科研的作用。保证医疗质量,更好地为患者服务。
  
  参考文献
  1 丛玉隆,邓新立.医学实验室全面质量管理体系的概念与建立[J].临床检验杂志,2001,19:305-309.
  2 康格非.临床生物化学[M].北京:人民卫生出版社,1993:7.
  3 丛玉隆,张海鹏,任珍群.血液学检验分析前质量控制的重要因素—标本的采取及其控制[J].中华医学检验杂志,1998,21(1):52-55.
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