枇杷DXR基因的克隆及其在果实成熟过程中的表达分析

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【目的】为了解枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.)1-脱氧木酮糖-5-磷酸(DXP)还原异构酶基因(DXR)的序列特点及其在果实成熟过程的表达特性,【方法】以不同类型枇杷品种‘早钟6号’(红肉)和‘白玉’(白肉)不同成熟阶段的果肉和果皮为试材,采用RT-PCR结合RACE法和qRT-PCR方法对DXR基因进行了克隆,并对其在枇杷果实成熟过程中的表达进行了分析,【结果】枇杷DXR基因的cDNA序列全长1 743 bp,编码473个氨基酸,蛋白质相对分子质量(Mw)为51 299.8 Da,等电点(pI)为6.52(GenBank登录号:JX089590)。qRT-PCR分析表明,在枇杷果实成熟过程中,DXR在不同类型枇杷的不同时期表达不尽相同:在果皮中,‘早钟6号’品种的DXR基因在果实成熟的各个阶段的表现为表达量较为稳定,而在‘白玉’品种中,DXR基因的表达存在较为明显的先增加后降低的过程,其表达量在褪绿期达到最高。而在果肉中,无论是‘早钟6号’还是‘白玉’品种,DXR基因的表达从果实成熟过程中的未转色期到黄熟期表现为持续下降;到成熟期时,‘早钟6号’品种的DXR基因存在明显的上调现象,而在‘白玉’品种中则无此明显变化,【结论】DXR基因对于枇杷类胡萝卜素的合成没有限制作用,至少作用不明显。
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