RNA干扰富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白3表达对胶质瘤细胞周期和凋亡的影响

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目的 探讨RNA干扰富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白3(LRIG3)基因表达后对胶质瘤细胞生长的影响及其机制.方法 设计两对含LRIG3特异性短发夹RNA(shRNA)序列的质粒及含非特异性shRNA的对照质粒,转染胶质瘤细胞系GL15、G418筛选出稳定株,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测LRIG3表达的改变,流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期变化,Annexin V-FITC/PI双标记分析细胞凋亡.结果 实验组细胞LRIG3 mRNA和蛋白水平与对照组比较分别下降了52.4%、63.8%和50.9%、67.4%.流式细胞仪分析显示,实验组的G2/M期细胞细胞百分率比对照组明显增加,细胞增殖指数显著增加(P<0.01);LRIG3基因表达下调后还具有显著的抗凋亡作用(P<0.05).结论 LRIG3特异性siRNA可明显抑制LRIG3基因的转录和表达,从而促进GL15细胞的增殖和使细胞周期阻滞在G2/M期并能抑制其凋亡。

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