HBV靶向腺相关病毒载体的构建与鉴定

来源 :医学分子生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woheni187170713
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目的:构建和鉴定HBsAg靶向性的重组2型腺相关病毒( adeno?associated virus, AAV2)载体。方法运用噬菌体展示技术筛选特异性结合HBsAg的多肽,通过重组PCR技术将特异性多肽插入到2型腺相关病毒(AAV2)核衣壳蛋白的587位氨基酸处,构建靶向结合HBsAg的重组AAV2病毒。流式细胞术检测重组病毒感染HepG2?215细胞的特异性。结果筛选得到HBsAg特异性多肽,序列为SSYAPYVWQ?PIA。成功构建了携带靶向 HBsAg 多肽的重组 AAV2,命名为 rAAVssyU6?hrGFP。 rAAVssyU6?hrGFP 对HepG2、 HepG2?215细胞的感染率较AAV2明显升高,对HepG2?215细胞的感染率最高, HBsAb封闭实验明显降低rAAVssyU6?hrGFP病毒感染HepG2?215细胞的效率。结论 rAAVssyU6?hrGFP对HepG2?215细胞的感染具有特异性,有望成为介导siRNA分子有效治疗HBV的靶向载体。
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