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以牛分枝杆菌Vallee111染色体DNA为模板,以MPB63成熟蛋白基因特异性引物进行PCR扩增,获得约400 bp的DNA片段.通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T Vector中,成功地构建出克隆载体pGEM-T-63.以BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切pGEM-T-63和pET28a(+),并将纯化的MPB63基因亚克隆至pET28a(+)中,构建出原核表达载体pET28a-63.将pET28a-63转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电