【摘 要】
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甲基营养菌WB1菌株在以甲胺磷作碳氮源的无机盐培养基上生长时,产生甲胺磷降解酶情况较好,培养20 h为细胞收获的适宜时期。所得细胞经过超声波破碎、吐温-20抽提、热处理(60℃,
【机 构】
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中国科学院武汉病毒研究所武汉,武汉大学生命科学院武汉
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甲基营养菌WB1菌株在以甲胺磷作碳氮源的无机盐培养基上生长时,产生甲胺磷降解酶情况较好,培养20 h为细胞收获的适宜时期。所得细胞经过超声波破碎、吐温-20抽提、热处理(60℃,9min)、DEAE-纤维素32和CM-纤维素32柱层析等步骤,得到的酶制品比活力为18.0U/mg,收率78.8%,纯化倍数22.8。纯化的酶制品经连续聚丙烯酰胺凝胶电泳,呈现一条主带,酶活力染色则呈现一条与之对应的活性谱带;该酶催化反应的适宜pH为9.0,底物专一性不强,Hg2+、Mn2+、Cu2+对酶有强烈的抑制作用。部分纯化酶制品在-20℃(0.1md/L的磷酸盐溶液中)存放5d,酶活力丧失约60%。
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