【摘 要】
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目的研究肝癌组织细胞样本于-80℃超低温保存条件下的质量控制，探讨肝癌组织细胞样本在超低温保存中的时效性。方法随机抽取超低温新鲜冻存（24 h内）、保存3个月、6个月和1年不同时长的肝癌和对应的癌旁组织细胞各12对，HE染色评估标本取材的准确性，采用Promega自动提取核酸仪提取肝脏细胞RNA，利用Agilent 2100生物分析仪进行RIN值及28S/18S比值分析。对新鲜冻存、保存3个月、6
【机 构】
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310003 杭州，浙江大学医学院附属第一医院卫生部多器官联合移植研究重点实验室 浙江省器官移植重点实验室,310003 杭州，浙江大学医学院附属第一医院卫生部多器官联合移植研究重点实验室 浙江省器官
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目的研究肝癌组织细胞样本于-80℃超低温保存条件下的质量控制，探讨肝癌组织细胞样本在超低温保存中的时效性。
方法随机抽取超低温新鲜冻存（24 h内）、保存3个月、6个月和1年不同时长的肝癌和对应的癌旁组织细胞各12对，HE染色评估标本取材的准确性，采用Promega自动提取核酸仪提取肝脏细胞RNA，利用Agilent 2100生物分析仪进行RIN值及28S/18S比值分析。对新鲜冻存、保存3个月、6个月以及1年的组织细胞样本的RIN值和28S/18S比值进行组间非配对t检验。
结果HE染色镜下观察发现切片组织细胞中肿瘤细胞比例达到80﹪以上，为生物样本库的合格样本。生物分析仪检测结果显示超低温新鲜冻存、保存3个月、6个月和1年的癌和癌旁组织细胞的RIN均值均>7.0，平均28S/18S比值均>1.5，组间非配对t检验显示，保存1年的肝癌组织细胞相比于新鲜冻存（7.442±0.674vs8.617±0.769，P = 0.001）、保存3个月（7.442±0.674vs8.275±0.617，P = 0.005）和6个月（7.442±0.674vs8.175±0.970，P = 0.043）的组织细胞RIN值显著下降，提示存在一定程度的RNA降解，而其余各组之间差异均无统计学意义（P均> 0.05）。
结论在超低温条件下新鲜冻存、保存3个月、6个月的肝癌及癌旁组织细胞，其质量均可以获得有效保证，而保存1年的肝癌组织细胞的RNA虽然存在一定程度的降解，但能够满足后续临床科研的要求。
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