【摘 要】
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目的:探讨清肝活血方及拆方对酒精性肝损伤大鼠内质网应激反应性凋亡GRP78/Bip、GRP94、caspase-12基因和蛋白表达的影响.方法:建立大鼠慢性酒精性肝损伤复合模型,第11周将造
【机 构】
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上海中医药大学脾胃病研究所,上海中医药大学附属龙华医院
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目的:探讨清肝活血方及拆方对酒精性肝损伤大鼠内质网应激反应性凋亡GRP78/Bip、GRP94、caspase-12基因和蛋白表达的影响.方法:建立大鼠慢性酒精性肝损伤复合模型,第11周将造模大鼠按体质量和状态均衡分为模型组、清肝活血方组9.5g/(kg?d)、清肝方组3g/(kg?d)、活血方组6.5g/(kg?d)和空白对照组,每组10只.各组每日上午仍灌胃给予乙醇混合液,下午给予药液或生理盐水,连续给药2wk,末次给药1h后称质量,腹主动脉采血,处死,分离肝脏.DNAladder法和流式细胞术对肝细胞凋亡进行定性和定量检测,RT-PCR和Westernblot法检测大鼠肝组织GRP78/Bip、GRP94和caspase-12基因和蛋白表达.结果:与正常组比较,造模12wk大鼠血清ALT和AST水平明显升高(138.3±43.3U/Lvs33.9±9.8U/L,257.4±162.3U/Lvs119.6±28.6U/L,P<0.01);肝细胞发生早期凋亡改变,总凋亡率和早期凋亡率分别达到29%和26%(P<0.01);肝组织GRP78/Bip、GRP94和caspase-12基因和蛋白表达明显增强(P<0.05或0.01).经2wk治疗后,清肝活血方及拆方均能明显降低酒精性肝损伤大鼠血清ALT、AST水平;抑制肝细胞凋亡,总凋亡率和早期凋亡率分别降至8%和6%;清肝活血方及清肝方显著降低肝组织GRP78/Bip、GRP94和caspase-12基因和蛋白表达,与模型组比较有统计学差异(P<0.05或0.01),而活血方组与模型组则无明显差异.结论:清肝活血方及拆方对酒精性肝损伤大鼠肝细胞凋亡均表现出较强的抑制作用,其机制可能与下调内质网应激反应性凋亡相关基因caspase-12、GRP78/Bip和GRP94表达有关.
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