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摘要：
翼状螺旋/叉头转录因子2 （forkhead transcription factor2，FOXL2），是第1个被认定在维持卵巢功能方面发挥重要作用的人类常染色体基因，对于卵泡的生长、发育及抗凋亡有促进作用，且在卵巢早衰中的作用也受到重视，目前是评估卵巢储备功能的一项直接指标。
关键词：FOXL2；卵巢储备功能；临床应用
【中图分类号】
R711.75 【文献标识码】B 【文章编号】1002-3763（2014）05-0105-01
女性出生时约有100万个卵子，青春期初潮时减至30～50万，随着年龄的增长，“卵泡池”逐渐耗竭，但卵巢的储备功能却因人而异，年龄、血清抑制素B （ inhibin B， INHB）、卵泡刺激素（ follicle stimulating hormone， FSH）、雌二醇（ estradial，E2）、抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone，AMH）测定及超声评估窦状卵泡数目（antral follicle count ，AFC）等都是目前评估卵巢储备功能的常用方法。近年来，翼状螺旋/叉头转录因子2 （forkhead transcription factor2，FOXL2），对于评估卵巢储备功能的作用倍受关注。
1 FOXL2的发现和概述
FOXL2是1995年Amati等在筛选小睑裂综合征致病基因时发现的，位于3号染色体的3q23区域，是一个2.7kb的单外显子基因，编码376个氨基酸，预期蛋白属于翼状螺旋/叉头转录因子调节家族，包含一个特定的forkhead DNA结构域（位置在第54～148残基区域）和一个与此分离但功能尚未阐明的多聚丙氨酸肽段。FOXL2是目前发现的决定卵巢分化的最早的标志性启动基因，其通过转录调控作用调节靶基因转录、蛋白表达，参与颗粒细胞增殖分化，对卵泡发育、女性生殖具有重要意义。[1]
2FOXL2对卵巢的作用
最近Lamba P等[2]，通过人、猪及鼠的Fshb/FSHB启动子对照实验发现FOXL2在一个调节卵泡刺激素β亚基转录的激活素中起重要作用。而Kim SY等[3]确定FOXL2的表达与雌激素受体（ER）-α之间有功能联系，并发现ER-α和FOXL2之间存在一个蛋白融合位点以调节卵巢发育及卵巢功能。
2.1 FOXL2对卵泡发育的作用：
Tang S[4]认为由于FOXL2突变使原始卵泡形成后的卵母细胞周围的体细胞不能生长增殖，次级卵泡缺乏，导致卵巢功能紊乱。而Pisarska MD等[5]研究发现FOXL2失活能够增强StAR和其他卵泡分化基因在小卵泡和未成熟卵泡中的表达，从而加速卵泡发育导致卵巢早衰。
研究发现FOXL2基因缺陷的小鼠在原始卵泡活化过程中出现卵泡遗失，而免疫定位显示FOXL2的表达限于生殖细胞和发育中的卵巢间质细胞，故FOXL2的表达对体细胞/生殖细胞起保护和支持的作用。[6]Führer[7]报道，FOXL2可能具有抗卵泡凋亡作用，据此分析表达降低的FOXL2可使卵泡凋亡闭锁加剧，卵巢内卵泡数目减少导致卵巢储备功能下降。
2.2 FOXL2对卵巢颗粒细胞的作用： FOXL2是已知的对卵巢颗粒细胞发育起关键作用的编码转录因子的基因。[8]Cocquet等[9]报道，FOXL2在性别分化决定前的生殖嵴细胞系开始表达，至成人卵巢颗粒细胞一直高表达。研究显示，卵巢黄素化颗粒细胞FOXL2表达水平与血清基础FSH呈负相关，提示FOXL2 mRNA表达下降可反映卵巢储备功能降低。FOXL2表达水平低下导致颗粒细胞有丝分裂受阻，而FSH受体仅存在于颗粒细胞。因此，分裂受阻的颗粒细胞表面FSH受体数量下降，故在超促排卵过程中卵巢对促排卵药物如FSH和HMG反应性降低，最终导致募集的卵泡数量减少。最近，发现FOXL2的主要生物学作用是促进、调节颗粒细胞的增殖和分化，是一种敏感且特异的标记物。而且在未分化颗粒细胞FOXL2高度表达，随着颗粒细胞趋于成熟其表达逐渐降低，[10、11]也就是说颗粒细胞越幼稚FOXL2表达越强。而Andren Vieyra C等[12]发现，在卵巢颗粒细胞视网膜母细胞瘤（Rb）基因缺失的情况下，窦前卵泡颗粒细胞分化标记物Inha表达增加，导致FOXL2和Cyp19a1芳香化水平及核受体Nr5a1、Nr5a2、Nr0b1的异常表达降低，促发卵巢早衰。
3 FOXL2对卵巢早衰的作用
3.1 FOXL2对BPES伴卵巢早衰的作用：
FOXL2基因突变导致睑裂狭小-上睑下垂-赘皮倒转综合征（blepharophimosis ptosis epicanthus inversus syndrome，BPES）。Nallathambi等[13]在对一个五代（包括4位BPES）印度家系的研究中发现一个新的突变c.684-698dup15，该突变导致结构内多聚丙氨酸的重復，体外研究显示，FOXL2-Ala19蛋白在COS-7细胞表达出现更高的细胞质稳定性，这是第1次在分子机制上证实Ⅰ型BPES的隐性遗传。
3.2 FOXL2对非BPES卵巢早衰的作用：
FOXL2基因在决定生殖年限和人类卵巢衰退方面起着重要作用。[14]Bodega B[15]采用直接测序法分析了120位表型正常的卵巢早衰患者的FOXL2编码区，结果显示240条染色体上FOXL2基因编码区无一突变，说明FOXL2编码区与无症状的卵巢早衰相关性极小。 綜上所述，FOXL2对卵泡、卵巢颗粒细胞，以及患或不患BPES的卵巢早衰起重要作用，并从基因水平指导卵巢早衰的诊断和治疗，是评估卵巢储备功能的一项直接指标。而目前对FOXL2在卵泡生长发育及卵巢早衰中的作用机制尚不十分清楚，且缺乏一个标准化检测方法，故其应用前景尚需进一步研究与探讨。
参考文献
[1] Nakamoto M，Matsuda M，Wang DS，et al.Molecular cloning and analysis of gonadal expression ofFoxl2 in the medaka .[J] Oryzias latipes，2006.344（1）：353-361.
[2] Lamba P，Fortin J，Tran S，et al.A novel role for the forkhead transcription factor FOXL2 in activin A-regulated follicle-stimulating hormone beta subunit transcription.[J] Mol Endocrinol，2009，23（7）：1001-1013.
[3] Kim SY，Weiss J，Tong M，et al.Foxl2，a forkhead transcription factor，modulates monclassical activity of the estrogen receptor-alpha.[J] Endocrinology，2009，150（11）：5085-5093.
[4] Tang S，Wang X，Lin L，et al.Mutation analysis of the FOXL2 gene in Chinese patients with blepharophimosis-ptosis-epicanthus inversus syndrom.[J] Mutagenesis，2006，21（1）35-39.
[5] Pisarska MD，Bae J，Klein C，et al.Forkhead l 2 is expressed in the ovary and represses the promoter activity of the steroidogenic acute regulatory gene.[J] Endocrinology，2004，145（7）：3424-3433.
[6] Duffin K，Bayne RA，Childs AJ，et al.The forkhead transcription factor FOXL2 is expressed in somatic cells of the human ovary prior of follicle formation.[J] Mol Hum Reprod，2009，15（12）：771-777.
[7] Führer D.Lessons from studies of complex genetic disorders：identification of FOXL2-a novel transcription factor on the wing to fertility .[J] Eur J Endocrinol，2002，146（1）：15-18.
[8] Shah SP，Kobel M，Senz J，et al.Mutation of FOXL2 in granulosa-cell tumors of the ovary.[J] N Engl J Med，2009，360（26）：2719-2729.
[9] Cocquet J，Pailhoux E，Jaubert F，et al.Evolution and expression of FOXL2.[J] Med Genet，2002，39（9）：916-922.
[10] Ellsworth BS，Egashira N，Haller JI，et al.FOXL2 in the pituitary molecular，genetic and developmental analysis.[J] Mol Endocrinol，2006，20：2796-2805.
[11] Schmidt D，Ovitt CE，Anlag K，et al.The murine winged-helix transcription factor Foxl2 is required for granulosa cell differentiation and ovary maintenance.[J] Dev Disease，2004，[3]：933-942.
[12] Andreu Vieyra C，Chen R，Matzuk MM，et al.Conditional deletion of the retinoblas toma（Rb） gene in ovarian granulosa cells leads to premature ovarian failure.[J] Mol Endocrinol，2008，22（9）：2141-2161.
[13] Nallathambi J，Moumné L，de Baere E，et al.A novel polyalanine expansion in FOXL2：the first evidence for a recessive form of the blepharophimosis syndrome（BPES） associated with ovarian dysfunction.[J]Hum Genet，2007，121（1）：107-12.
[14] Choi Y，Rajkovic A.Genetics of early m am m alian folliculogenesis.[J]Cell Mol Life Sci，2006，63（5）：579-90.
[15] Bodega B，Porta C，Crosignani PG，et al.Mutations in the coding region of the FOXL2 gene are not a major cause of idiopathic premature ovarian failure.[J] Mol Hum Reprod，2004，10（8）：555-557.
翼状螺旋/叉头转录因子2 （forkhead transcription factor2，FOXL2），是第1个被认定在维持卵巢功能方面发挥重要作用的人类常染色体基因，对于卵泡的生长、发育及抗凋亡有促进作用，且在卵巢早衰中的作用也受到重视，目前是评估卵巢储备功能的一项直接指标。
关键词：FOXL2；卵巢储备功能；临床应用
【中图分类号】
R711.75 【文献标识码】B 【文章编号】1002-3763（2014）05-0105-01
女性出生时约有100万个卵子，青春期初潮时减至30～50万，随着年龄的增长，“卵泡池”逐渐耗竭，但卵巢的储备功能却因人而异，年龄、血清抑制素B （ inhibin B， INHB）、卵泡刺激素（ follicle stimulating hormone， FSH）、雌二醇（ estradial，E2）、抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone，AMH）测定及超声评估窦状卵泡数目（antral follicle count ，AFC）等都是目前评估卵巢储备功能的常用方法。近年来，翼状螺旋/叉头转录因子2 （forkhead transcription factor2，FOXL2），对于评估卵巢储备功能的作用倍受关注。
1 FOXL2的发现和概述
FOXL2是1995年Amati等在筛选小睑裂综合征致病基因时发现的，位于3号染色体的3q23区域，是一个2.7kb的单外显子基因，编码376个氨基酸，预期蛋白属于翼状螺旋/叉头转录因子调节家族，包含一个特定的forkhead DNA结构域（位置在第54～148残基区域）和一个与此分离但功能尚未阐明的多聚丙氨酸肽段。FOXL2是目前发现的决定卵巢分化的最早的标志性启动基因，其通过转录调控作用调节靶基因转录、蛋白表达，参与颗粒细胞增殖分化，对卵泡发育、女性生殖具有重要意义。[1]
2FOXL2对卵巢的作用
最近Lamba P等[2]，通过人、猪及鼠的Fshb/FSHB启动子对照实验发现FOXL2在一个调节卵泡刺激素β亚基转录的激活素中起重要作用。而Kim SY等[3]确定FOXL2的表达与雌激素受体（ER）-α之间有功能联系，并发现ER-α和FOXL2之间存在一个蛋白融合位点以调节卵巢发育及卵巢功能。
2.1 FOXL2对卵泡发育的作用：
Tang S[4]认为由于FOXL2突变使原始卵泡形成后的卵母细胞周围的体细胞不能生长增殖，次级卵泡缺乏，导致卵巢功能紊乱。而Pisarska MD等[5]研究发现FOXL2失活能够增强StAR和其他卵泡分化基因在小卵泡和未成熟卵泡中的表达，从而加速卵泡发育导致卵巢早衰。
研究发现FOXL2基因缺陷的小鼠在原始卵泡活化过程中出现卵泡遗失，而免疫定位显示FOXL2的表达限于生殖细胞和发育中的卵巢间质细胞，故FOXL2的表达对体细胞/生殖细胞起保护和支持的作用。[6]Führer[7]报道，FOXL2可能具有抗卵泡凋亡作用，据此分析表达降低的FOXL2可使卵泡凋亡闭锁加剧，卵巢内卵泡数目减少导致卵巢储备功能下降。
2.2 FOXL2对卵巢颗粒细胞的作用： FOXL2是已知的对卵巢颗粒细胞发育起关键作用的编码转录因子的基因。[8]Cocquet等[9]报道，FOXL2在性别分化决定前的生殖嵴细胞系开始表达，至成人卵巢颗粒细胞一直高表达。研究显示，卵巢黄素化颗粒细胞FOXL2表达水平与血清基础FSH呈负相关，提示FOXL2 mRNA表达下降可反映卵巢储备功能降低。FOXL2表达水平低下导致颗粒细胞有丝分裂受阻，而FSH受体仅存在于颗粒细胞。因此，分裂受阻的颗粒细胞表面FSH受体数量下降，故在超促排卵过程中卵巢对促排卵药物如FSH和HMG反应性降低，最终导致募集的卵泡数量减少。最近，发现FOXL2的主要生物学作用是促进、调节颗粒细胞的增殖和分化，是一种敏感且特异的标记物。而且在未分化颗粒细胞FOXL2高度表达，随着颗粒细胞趋于成熟其表达逐渐降低，[10、11]也就是说颗粒细胞越幼稚FOXL2表达越强。而Andren Vieyra C等[12]发现，在卵巢颗粒细胞视网膜母细胞瘤（Rb）基因缺失的情况下，窦前卵泡颗粒细胞分化标记物Inha表达增加，导致FOXL2和Cyp19a1芳香化水平及核受体Nr5a1、Nr5a2、Nr0b1的异常表达降低，促发卵巢早衰。
3 FOXL2对卵巢早衰的作用
3.1 FOXL2对BPES伴卵巢早衰的作用：
FOXL2基因突变导致睑裂狭小-上睑下垂-赘皮倒转综合征（blepharophimosis ptosis epicanthus inversus syndrome，BPES）。Nallathambi等[13]在对一个五代（包括4位BPES）印度家系的研究中发现一个新的突变c.684-698dup15，该突变导致结构内多聚丙氨酸的重復，体外研究显示，FOXL2-Ala19蛋白在COS-7细胞表达出现更高的细胞质稳定性，这是第1次在分子机制上证实Ⅰ型BPES的隐性遗传。
3.2 FOXL2对非BPES卵巢早衰的作用：
FOXL2基因在决定生殖年限和人类卵巢衰退方面起着重要作用。[14]Bodega B[15]采用直接测序法分析了120位表型正常的卵巢早衰患者的FOXL2编码区，结果显示240条染色体上FOXL2基因编码区无一突变，说明FOXL2编码区与无症状的卵巢早衰相关性极小。 綜上所述，FOXL2对卵泡、卵巢颗粒细胞，以及患或不患BPES的卵巢早衰起重要作用，并从基因水平指导卵巢早衰的诊断和治疗，是评估卵巢储备功能的一项直接指标。而目前对FOXL2在卵泡生长发育及卵巢早衰中的作用机制尚不十分清楚，且缺乏一个标准化检测方法，故其应用前景尚需进一步研究与探讨。
参考文献
[1] Nakamoto M，Matsuda M，Wang DS，et al.Molecular cloning and analysis of gonadal expression ofFoxl2 in the medaka .[J] Oryzias latipes，2006.344（1）：353-361.
[2] Lamba P，Fortin J，Tran S，et al.A novel role for the forkhead transcription factor FOXL2 in activin A-regulated follicle-stimulating hormone beta subunit transcription.[J] Mol Endocrinol，2009，23（7）：1001-1013.
[3] Kim SY，Weiss J，Tong M，et al.Foxl2，a forkhead transcription factor，modulates monclassical activity of the estrogen receptor-alpha.[J] Endocrinology，2009，150（11）：5085-5093.
[4] Tang S，Wang X，Lin L，et al.Mutation analysis of the FOXL2 gene in Chinese patients with blepharophimosis-ptosis-epicanthus inversus syndrom.[J] Mutagenesis，2006，21（1）35-39.
[5] Pisarska MD，Bae J，Klein C，et al.Forkhead l 2 is expressed in the ovary and represses the promoter activity of the steroidogenic acute regulatory gene.[J] Endocrinology，2004，145（7）：3424-3433.
[6] Duffin K，Bayne RA，Childs AJ，et al.The forkhead transcription factor FOXL2 is expressed in somatic cells of the human ovary prior of follicle formation.[J] Mol Hum Reprod，2009，15（12）：771-777.
[7] Führer D.Lessons from studies of complex genetic disorders：identification of FOXL2-a novel transcription factor on the wing to fertility .[J] Eur J Endocrinol，2002，146（1）：15-18.
[8] Shah SP，Kobel M，Senz J，et al.Mutation of FOXL2 in granulosa-cell tumors of the ovary.[J] N Engl J Med，2009，360（26）：2719-2729.
[9] Cocquet J，Pailhoux E，Jaubert F，et al.Evolution and expression of FOXL2.[J] Med Genet，2002，39（9）：916-922.
[10] Ellsworth BS，Egashira N，Haller JI，et al.FOXL2 in the pituitary molecular，genetic and developmental analysis.[J] Mol Endocrinol，2006，20：2796-2805.
[11] Schmidt D，Ovitt CE，Anlag K，et al.The murine winged-helix transcription factor Foxl2 is required for granulosa cell differentiation and ovary maintenance.[J] Dev Disease，2004，[3]：933-942.
[12] Andreu Vieyra C，Chen R，Matzuk MM，et al.Conditional deletion of the retinoblas toma（Rb） gene in ovarian granulosa cells leads to premature ovarian failure.[J] Mol Endocrinol，2008，22（9）：2141-2161.
[13] Nallathambi J，Moumné L，de Baere E，et al.A novel polyalanine expansion in FOXL2：the first evidence for a recessive form of the blepharophimosis syndrome（BPES） associated with ovarian dysfunction.[J]Hum Genet，2007，121（1）：107-12.
[14] Choi Y，Rajkovic A.Genetics of early m am m alian folliculogenesis.[J]Cell Mol Life Sci，2006，63（5）：579-90.
[15] Bodega B，Porta C，Crosignani PG，et al.Mutations in the coding region of the FOXL2 gene are not a major cause of idiopathic premature ovarian failure.[J] Mol Hum Reprod，2004，10（8）：555-557.