【摘 要】
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目的 观察转基因方法诱导人血红素加氧酶1(hHO-1)过表达对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用.方法 构建SD大鼠的肾脏缺血再灌注模型.治疗组(18只),经供肾动脉用负载人血红素加氧酶-1腺病毒(Ad-hHO-1)2.5×109pfu/只灌注保存1 h用以转染肾细胞.模型组(12只)和空载体组(18只)则分别用生理盐水1.0 ml和腺病毒空载体(Ad-EGFP)2.5×109pfu/只代替.检测各组大
【机 构】
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目的 观察转基因方法诱导人血红素加氧酶1(hHO-1)过表达对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用.方法 构建SD大鼠的肾脏缺血再灌注模型.治疗组(18只),经供肾动脉用负载人血红素加氧酶-1腺病毒(Ad-hHO-1)2.5×109pfu/只灌注保存1 h用以转染肾细胞.模型组(12只)和空载体组(18只)则分别用生理盐水1.0 ml和腺病毒空载体(Ad-EGFP)2.5×109pfu/只代替.检测各组大鼠外周血尿素氮和肌酐水平;HE染色和电镜观察缺血再灌注损伤后肾脏的组织形态变化;原位末端标记(TUNEL)法检测肾组织中细胞凋亡情况;免疫组化方法观察肾脏内hHO-1的表达;定量检测肾组织中hHO-1的酶活性.结果 经肾动脉灌注Ad-hHO-1可以成功转染大鼠肾脏细胞,治疗组肾组织中hHO-1的酶活性[(1.62±0.07)nmol·mg-1·min-1]明显高于模型组[(1.27±0.07)nmol·mg-1·min-1]和空载体组[(1.22±0.06)nmol·mg-1·min-1](P＜0.01).免疫组化证实治疗组的肾组织内有大量hHO-1表达,而凋亡细胞减少,相应的肾功能生化检查及肾组织形态变化较模型组和空载体组明显改善.结论 hHO-1在大鼠肾脏中的过表达可以显著减弱缺血再灌注对肾脏引起的损伤。
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