摘 要 目的：探讨全自动梯形微板法检测RhD血型试剂配制的最佳比例，提高RhD血型检测结果的准确性。方法：分别使用RhD血型定型试剂和生理盐水以1∶5、1∶12、1∶20配制比例的血型试剂对每位献血者留取的1份抗凝试管样本，应用全自动血型仪梯形微板法进行RhD血型自动检测。RhD阴性者应用抗人球蛋白法进行确证实验。结果：350例样本中，使用1∶5配制比例的血型试剂1次判读后结果相符率为97%，1∶12配制比例的血型试剂1次判读后结果相符率为100%，1∶20配制比例的血型试剂1次判读后结果相符率为98%。对RhD阴性血1∶5配制比例的血型试剂1次判读后结果相符率为83%，1∶12配制比例的血型试剂1次判读后结果相符率为100%，1∶20配制比例的血型试剂1次判读后结果相符率为93%。结论：全自动梯形微板法检测RhD血型技术有着不可替代的优越性，适合血站工作特点，但试剂配制的比例可影响血型仪的检测结果，造成全自动血型仪错判或漏判，工作人员应根据各实验室的不同情况使用恰当的血型试剂配制比例，以进一步提高检测结果的准确性。
　　关键词 梯形微板法 全自动血型检测
　　
　　Rh血型系统是最复杂的遗传多态性血型系统之一，在临床上的重要性，仅次于ABO血型系统而处于第2位。在输血治疗和母婴免疫引起的新生儿溶血病的临床医学中更有着重要的意义^［1］。而RhD抗原因其高的免疫原性而最具临床价值，产生的抗体往往可持续多年，甚至终身^［2］。随着输血技术的发展，全自动样品处理系统在各级采供血机构得到广泛应用，利用全自动样本处理系统对献血者进行RhD血型进行定型，实现了RhD血型检测的自动化、标准化，保证了检测结果的准确性，降低了工作人员的劳动强度。但在实际工作中全自动梯形微板法血型检测时需将RhD血型定型试剂用生理盐水进行稀释。如何能以最适当比例配制血型试剂，提高全自动血型检测设备检测RhD血型1次判读的准确性，现对此进行总结分析与探讨。
　　
　　资料与方法
　　资料来源：无偿献血者200人次，每人留取试管枸橼酸钠抗凝样本5ml。
　　试剂：RhD（IgM）血型定型试剂（单克隆抗体）,上海血液生物医药有限责任公司,经中国药品生物制品检定所批检合格；氯化钠注射液500ml∶4.5g（太龙药业股份有限公司）；以上试剂均在有效期内使用。
　　主要仪器：Xantus全自动血型仪（爱康电子有限公司）；KA-2200离心机（久保田公司）；120孔梯形微板（奥林巴斯公司）。
　　方法：①梯形微板法进行RhD定型：用全自动血型仪将试管样本浓缩红细胞10μl连同生理盐水200μl一同加到预稀释板中，充分混合后，每份样本吸取50μl加注到梯形微板板孔中，再在每孔中分别加注RhD血型定型试剂和生理盐水以1∶5、1∶12、1∶20配制比例的血型试剂25μl，振荡混匀，静置反应后，数字血型仪分析反应图像，根据RhD（IgM）血型定型原则判定结果。
　　结果判定：判定结果时，工作人员需目测微板上结果，与电脑中判读的结果相对照，即电脑结果-目测结果两对照，均符合者，按此结果发送报告，如两者不符或与档案信息不符要用试管法对检测标本进一步做RhD定型。如为RhD阴性，按《全国临床检验操作规程》进行确证^［3］。
　　质量控制：每批试验均做试剂阴性、阳性对照，定期参加卫生部临床检验中心的室间质量评价活动。
　　
　　结 果
　　不同配制比例的RhD血型试剂判读结果：结果见表1。
　　
　　讨 论
　　经典的试管离心法目前仍被认为是最可信赖的RhD定型方法，但是它操作费时，且易出现人为差错，故不适合采供血系统大批量样本的检测。根据血站工作特点，微板法适合于大批量样本的血型鉴定，只是对不符或可疑的样本才进一步做试管法确定。但根据我们的试验结果，梯形微板法全自动血型检测结果受多种因素的影响尤其是血型试剂配制的比例直接影响判读结果根据我们的试验结果，梯形微板法全自动血型检测的试剂配制以RhD血型定型试剂和生理盐水1∶12为宜，过浓或过淡均影响检测结果，尤其对RhD阴性血影响最大，所以选择恰当比例配制血型试剂可大大提高了全自动梯形微板法检测RhD的准确性和符合性。
　　
　　参考文献
　　1 李军,任召祺,李俊祺,等.输血前进行RhD检测的重要意义［J］.北京医学,2005,27（12）:817.
　　2 高峰.输血与输血技术［M］.北京:人民卫生出版社,2003:182.
　　3 卫生部医政司.全国临床检验操作规程［M］.第3版.南京:东南大学出版社,2006:249-251.
　　
　　表1 不同配制比例的RhD血型试剂判读结果［例（%）］