【摘 要】
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目的探讨Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coil containing protein kinase 2,Rock2)调控基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)对肝癌细胞
【机 构】
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南昌大学第二附属医院肝胆外科,南昌大学第二附属医院麻醉科,江西省分子医学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30860272);江西省自然科学基金对外科技合作计划资助项目(20132BDH80031)
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目的探讨Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coil containing protein kinase 2,Rock2)调控基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)对肝癌细胞侵袭迁移能力的影响。方法用Western blot法检测30例肝癌组织及对应癌旁组织中Rock2和MMP2的蛋白表达,同时分析它们之间的关联;用荧光定量PCR和Western blot法观察稳定降低Rock2细胞中MMP2 mRNA及蛋白表达变化;利用PCR定点突变技术构建Rock2同义突变质粒"恢复"稳定干扰Rock2的肝癌细胞中Rock2表达后检测MMP2蛋白表达变化;采用Transwell侵袭实验和划痕实验观察空白对照组、稳定低表达Rock2组、"恢复"Rock2组HepG2细胞侵袭和迁移能力变化。结果Rock2和MMP2蛋白在肝癌组织中均比对应癌旁组织明显增高,且两者的表达呈正相关性。稳定降低肝癌细胞中Rock2的表达后发现MMP2的mRNA和蛋白表达也随之降低;另外,"恢复"稳定干扰Rock2的肝癌细胞中Rock2的表达,MMP2表达也"恢复";同时证实Rock2通过调节MMP2表达从而影响肝癌细胞的侵袭和迁移。结论在原发性肝癌细胞中降低Rock2可引起MMP2表达下降,进而抑制肝癌细胞的侵袭和迁移。
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