【摘 要】
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通过建立一种检测水貂细小病毒(mink enteritis virus,MEV) IgG抗体的间接ELISA方法,旨在为MEV感染检测与免疫效果评价提供技术手段.以纯化的重组MEV VP2蛋白作为包被抗原,以
【机 构】
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中国农业科学院特产研究所,吉林长春130112;农业农村部经济动物疫病重点实验室,吉林长春130112;中国农业科学院特产研究所,吉林长春130112;农业农村部经济动物疫病重点实验室,吉林长春130
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通过建立一种检测水貂细小病毒(mink enteritis virus,MEV) IgG抗体的间接ELISA方法,旨在为MEV感染检测与免疫效果评价提供技术手段.以纯化的重组MEV VP2蛋白作为包被抗原,以HRP-羊抗雪貂IgG为二抗,通过优化反应条件,建立了检测MEV特异性IgG抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性、敏感性及重复性试验;通过临床样品检测评价ELISA方法与HI试验的符合率,制备阳性参考品并设定酶联免疫单位(enzyme immune units,EIU)的计算方法,以测定样品中抗MEV IgG抗体的相对含量,分析ELISA方法检测血清特异性IgG抗体水平与中和抗体的相关性.结果 显示,ELISA方法的最佳抗原包被质量浓度为1.425 mg/L,待检血清和酶标抗体的工作浓度分别为1∶80与1∶2 000倍稀释.结果 表明,该ELISA方法能够特异地检测MEV抗体,与水貂犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)的抗血清无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数低于5％,血清特异性IgG抗体水平与中和抗体效价之间存在线性关系,呈显著的正相关(r =0.946 1,P＜0.001).
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