【摘 要】
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目的：探讨黄芪-丹参药对通过调节微小核糖核酸-466b-5P（miR-466b-5p）改善高血压肾损害的机制。方法：基于微RNA（miRNA）测序寻找自发性高血压大鼠与Wistar-京都鼠（WKY）的差异基因，构建腺相关病毒转染小鼠，24只C57BL/6小鼠，随机选取12只尾静脉注射小鼠腺相关病毒miR-466b-5P（rAAV-miR-466b-5P）构建miR-466b-5p过表达组，余12只
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（81673812）；
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目的：探讨黄芪-丹参药对通过调节微小核糖核酸-466b-5P（miR-466b-5p）改善高血压肾损害的机制。方法：基于微RNA（miRNA）测序寻找自发性高血压大鼠与Wistar-京都鼠（WKY）的差异基因，构建腺相关病毒转染小鼠，24只C57BL/6小鼠，随机选取12只尾静脉注射小鼠腺相关病毒miR-466b-5P（rAAV-miR-466b-5P）构建miR-466b-5p过表达组，余12只作为空白对照组注射腺相关病毒-9（AAV-9）空载体，转染6周后再各随机分为2组，每组6只，A组（黄芪-丹参+miR-466b-5P过表达组）和C组（黄芪-丹参+空白对照组）以黄芪配方颗粒：2.036 g/kg+丹参配方颗粒：0.255 g/kg灌胃；B组（miR-466b-5P过表达组）和D组（空白对照组）以相同体积生理盐水灌胃；灌胃28 d后观察各组小鼠尿β2-微球蛋白（β2-MG）、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）、微量白蛋白（mALB）,血清胱抑素C（Cys-C）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、C反应蛋白（CRP）水平和肾脏病理，进行实时荧光定量（RT-qPCR）与蛋白质印迹法（Western Blotting）寻找其靶基因。结果：1)基于前期miRNA测序选定了miR-466b-5p; 2)与D组比较，B组小鼠尿β2-MG、NAG、mALB、血清Cys-C、AngⅡ、CRP均显著升高（P＜0.01）;与B组比较，A组小鼠血清Cys-C、CRP明显升高（P＜0.05）,尿β2-MG、NAG、mALB、血清AngⅡ无明显改变（P＞0.05）;3)与D组比较，B组小鼠出现明显肾小球硬化、小管纤维化，A组较B组有明显改善；4)与D组比较，B组小鼠透明质酸酶2（HAS2）明显下调，而经黄芪-丹参干预后有所回调。结论：miR-466b-5p的过表达会导致高血压肾损害的发生，黄芪-丹参药对通过靶向HAS2下调miR-466b-5p改善高血压肾损害。
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