探讨长链非编码RNA AL117378.1对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。
方法选取2016年8月—2017年12月鄂东医疗集团黄石市中心医院收治的14例膀胱癌患者的肿瘤组织及癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测14例膀胱癌组织及对应的癌旁组织、膀胱癌细胞株(5637、J82、T24、BIU-87)及对应的人膀胱正常上皮细胞(SV-HUC-1)中AL117378.1的表达水平。以表达水平最低的膀胱癌细胞株为对象分别转染阴性对照质粒(对照组)和载有AL117378.1的质粒(实验组)。qRT-PCR检测转染后细胞中AL117378.1和非受体型蛋白质酪氨酸磷酸酶9(PTPN9) mRNA的表达水平。Western blotting检测PTPN9、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞周期蛋白依懒性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白A2(Cyclin A2)蛋白的表达水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验和Transwell侵袭实验分别检测两组细胞的增殖能力和侵袭能力。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用两独立样本t检验。
结果膀胱癌组织中AL117378.1的表达低于癌旁组织(P<0.01)。膀胱癌细胞株中AL117378.1的表达均低于人膀胱正常上皮细胞(P<0.01),其中AL117378.1在J82细胞中的表达水平最低(P<0.01)。对照组和实验组J82细胞中AL117378.1的相对表达量分别为1.02±0.11和7.96±1.06,差异具有统计学意义(t=6.51,P<0.01);PTPN9 mRNA的相对表达量分别为1.01±0.08和4.99±0.50,差异具有统计学意义(t=7.84,P<0.01)。Western blotting实验结果显示,PTPN9和E-cadherin蛋白表达升高,α-SMA、CDK4和Cyclin A2蛋白表达降低。MTT实验结果显示,转染AL117378.1的细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示,对照组和实验组的侵袭细胞数分别为(97.96±13.71)个和(38.02±7.51)个,差异具有统计学意义(t=3.84,P<0.01)。
结论AL117378.1在膀胱癌组织和细胞株(5637、J82、T24、BIU-87)中表达均明显减少,AL117378.1可通过正向调控PTPN9基因的表达明显抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭。