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通过对酶催化部分水解反应和酶催化酯化反应的有效整合,提出了全酶法制备甘油二酯的工艺,主要就工艺中的脂肪酸酶法酯化反应进行了研究。以油脂部分水解反应所得到的脂肪酸为底物,探讨了反应形式、底物配比、反应体系温度、进料流速等因素对反应的影响,并对酯化反应产物进行分子蒸馏提纯。较优的反应条件为:脂肪酶Lipozyme RMIM,采用填充床酶反应器连续酯化的反应形式,脂肪酸与甘油的摩尔比为1:1,进料流速1.5mL/min,反应温度60℃,此时脂肪酸转化率达到76.2%,产物经过分子蒸馏提纯后,可以获得含量达到92