【摘 要】
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目的 观察原代培养3～4时期的神经干细胞(NSC)经过原癌基因Bmi-1的RNA干扰(RNAi)后是否发生衰老和衰老后的表象,以及Bmi-1下游基因p16INK4a的表达.方法 培养流产胎儿皮层来源的
【机 构】
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北京,首都医科大学宣武医院神经外科,教育部神经变性病重点实验室
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目的 观察原代培养3～4时期的神经干细胞(NSC)经过原癌基因Bmi-1的RNA干扰(RNAi)后是否发生衰老和衰老后的表象,以及Bmi-1下游基因p16INK4a的表达.方法 培养流产胎儿皮层来源的NSC.经过Bmi-1基因RNA干扰后,检测其衰老情况和细胞增殖能力的改变,以及其下游基因p16INK4a基因通路的改变.结果 体外培养3～4周的NSC增殖旺盛,经过Bmi-1基因RNA干扰,衰老细胞明显增多,表现为衰老染色阳性的细胞数目从(18.57±2.20)%增加到(33.79±7.79)%,但细胞凋亡并无明显增加.与细胞衰老相适应,NSC生长速度变慢,表现为Bmi-1基因RNA干扰1周后神经干细胞的BrdU掺入率(13.2±4.1)%,明显低于空病毒转染组的(23.1±5.5)%.此外,干扰后的NSC细胞中Bmi-1基因的转录明显下调至对照组的约40%,而其下游基因p16INK4a基因明显升高到GFP对照组的10倍以上.结论 体外培养的人类纹状体神经干细胞中Bmi-1基因转录水平下降,能够诱发细胞衰老,表现为细胞增殖能力下降.Bmi-l基因下调所引发的衰老可能和p16INK4a基因转录水平升高有关.
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