猪伪狂犬病病毒鄂A株的分离鉴定

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fuwutu
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从湖北省某些猪场大批死亡的新生仔猪的脑及内脏中分离到多株病毒,并用其中一代表毒株进行了全面鉴定。该病毒株在仓鼠肾传代细胞上连传15代均出现典型细胞病变,用适应BHK-21细胞的病毒接种鸡胚成纤维细胞、Hela细胞、Vero细胞、犊牛睾丸原代细胞、猪肾传代细胞IBRS-2均出现典型细胞病变。在电镜下可见到典型的伪狂犬病病毒粒子。病毒对5-碘脱氧尿核苷、氯仿、胰蛋白酶、乙醚敏感,在pH5.0~9.0下稳定,56℃30min灭活,病毒能被伪狂犬病病毒标准阳性血清中和。病毒接种家兔和小白鼠均出现典型伪狂犬病症状。进而用所分离病毒的DNA作为模板,应用特异性引物,通过聚合酶链式反应扩增出伪狂犬病病毒gp50基因中433-651之间217bp长的特异性片段,用地高辛标记的伪狂犬病病毒DNABamHI-7片段作探针与所分离病毒的DNA进行斑点杂交,出现特异性杂交斑点。结果表明所分离病毒为伪狂犬病病毒,并将该毒株命名为猪伪狂犬病病毒鄂A株。
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