【摘 要】
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目的构建天蚕素A（1～8）-蛙皮素（1～12）杂合基因抗菌肽（CA-MA杂合肽）突变体,在大肠杆菌中融合表达,并进行抗菌活性检测。方法采用PCR体外定点突变技术,设计1对方向相反的引物,其中1个引
【机 构】
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兰州大学基础医学院生物化学与分子生物学研究所
【基金项目】
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国家“863”计划资助项目（2006AA10A208-1-4）.
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目的构建天蚕素A（1～8）-蛙皮素（1～12）杂合基因抗菌肽（CA-MA杂合肽）突变体,在大肠杆菌中融合表达,并进行抗菌活性检测。方法采用PCR体外定点突变技术,设计1对方向相反的引物,其中1个引物引入突变点,应用高保真的PolybestDNA多聚酶进行重组表达质粒pGEX-4T-1-CA-MA的PCR扩增,使CA-MA杂合肽第16位密码子由AGT突变为TGG。将扩增片段自身连接,构建CA-MA杂合肽突变重组表达质粒pGEX-4T-1-W16-CA-MA,转化E.coliBL21,IPTG诱导表达突变体蛋
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