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【摘要】目的研究趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在乳腺癌中的表达方式，并探讨其与乳腺癌的临床病理特征的关系。方法采用免疫组化技术检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在40例乳腺癌细胞组织和40例正常乳腺细胞中的表达，并分析其表达与患者年龄、肿瘤大小、分化程度与淋巴转移的临床特征关系。结果趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在乳腺癌细胞中表达率为73.7%、62.5%明显高于正常乳腺细胞23.6%、20.3%，两组数据具有明显统计学意义（P<0.01），且CXCL12、CXCR4在乳腺癌组织中表达与患者年龄、肿瘤大小以及分化程度无关（P>0.05），与淋巴转移有密切相关（P<0.01）。结论CXCL12、CXCR4在乳腺癌组织中有较高表达率，抑制CXCL12、CXCR4在乳腺癌组织中的表达可为临床阻断癌细胞转移提供重要途径。
【关键词】乳腺癌；CXCL12和CXCR4；表达和意义
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.04.076文章编号：1004-7484（2014）-04-1876-01趋化因子受体是CXCR4是趋化因子CXCL12的唯一受体，并参与体内多种病理和生理过程，趋化因子CXCL12以及受体CXCR4在肿瘤的发生和发展过程有着重要作用[1]。最近研究发现，CXCL12、CXCR4在多种恶性肿瘤中表达水平明显升高，乳腺癌作为是女性最严重的恶性肿瘤疾病之一，其在乳腺癌细胞中发挥重要作用。本研究通过检测CXCL12、CXCR4在乳腺癌细胞中的表达和临床病理特征关系，探讨其在乳腺癌组织转移的作用，从而为临床阻断癌细胞转移提供重要依据。1资料与方法
1.1临床资料选取我院2010年2月——2013年2月分期间乳腺手术切除标本80例，在每例乳腺癌标本中取其肿瘤组织与正常乳腺组织分别作为观察组和对照组。80例乳腺标本均为女性，年龄38-65岁，平均年龄为46.3岁，根据组织分化程度分别为Ⅰ级15例，Ⅱ级48例，Ⅲ级17例，其中浸润性导管癌39例，浸润性小叶癌24例，髓样癌7例，清润性微乳头状癌5例，小管癌3例，粘液性癌2例；有淋巴转移48例，无淋巴转移32例；全部标本术前无放疗与化疗处理，均用甲醛固定以及石蜡包埋。
1.2方法将石蜡包埋的组织切成4μm厚的切片，经二甲苯脱蜡和梯度酒精水化后滴加3%的H2O2阻断内源性过氧化酶，孵育10min，然后用三羟甲基氨基甲烷缓冲液（trisbuffered saline，TBS）洗涤3次，置于95℃-100℃、pH6.0的柠檬酸缓冲液煮沸20min，再用TBS洗涤3次，滴加一抗（CXCR4 1：400）湿盒中37℃下孵育60min；TBS洗涤3次，滴加E-VISIONTM反应液，50μl/片，37℃下孵育30min；TBS洗涤3次，0.4%色源底物溶液3，3’-二氨基联苯胺（3，3’-diaminobenzidine，DAB）+0.3%H2O2孵育，光镜下观察到棕黄色反应后终止。最后用流水洗，苏木素复染，递增梯度酒精脱水，二甲苯透明，常规树脂封片[2]。
1.3疗效判定CXCL12、CXCR4半定量评分标准参照Shimizu等方法，按阳性强度和面积分别记为0、1、2、3分，根据两项记分之和判断其结果：<3分为（-），3分为（+），4分为（++），5-6分为（+++）[3]。
1.4统计学意义采用SPSS18.0统计软件包进行统计学处理，计量资料以χ±s表示，计数资料中的两因素构成比使用x2检验分析，相关性分析用非参数Spearman相关检验。当两组数据统计差异P<0.05時，说明具有统计学意义[4]。2结果
2.1CXCL12和CXCR4在乳腺细胞中的表达趋化因子CXCL12及其受体CXCR4主要在肿瘤细胞的细胞质中表达，免疫化组织呈棕黄色，且CXCL12和CXCR4在乳腺癌细胞中表达率分别为73.7%、62.5%明显高于正常乳腺细胞23.6%、20.3%，两组数据有明显统计学差异（P<0.01），统计有意义。
2.2CXCL12和CXCR4与临床病理的关系趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在乳腺癌细胞的表达与患者的年龄、肿瘤大小和分化程度无关，根据统计学分析处理（P>0.05），无统计学意义。而其与淋巴转移有密切联系，经统计学分析处理（P<0.01），具有统计学意义，见表1。
【关键词】乳腺癌；CXCL12和CXCR4；表达和意义
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.04.076文章编号：1004-7484（2014）-04-1876-01趋化因子受体是CXCR4是趋化因子CXCL12的唯一受体，并参与体内多种病理和生理过程，趋化因子CXCL12以及受体CXCR4在肿瘤的发生和发展过程有着重要作用[1]。最近研究发现，CXCL12、CXCR4在多种恶性肿瘤中表达水平明显升高，乳腺癌作为是女性最严重的恶性肿瘤疾病之一，其在乳腺癌细胞中发挥重要作用。本研究通过检测CXCL12、CXCR4在乳腺癌细胞中的表达和临床病理特征关系，探讨其在乳腺癌组织转移的作用，从而为临床阻断癌细胞转移提供重要依据。1资料与方法
1.1临床资料选取我院2010年2月——2013年2月分期间乳腺手术切除标本80例，在每例乳腺癌标本中取其肿瘤组织与正常乳腺组织分别作为观察组和对照组。80例乳腺标本均为女性，年龄38-65岁，平均年龄为46.3岁，根据组织分化程度分别为Ⅰ级15例，Ⅱ级48例，Ⅲ级17例，其中浸润性导管癌39例，浸润性小叶癌24例，髓样癌7例，清润性微乳头状癌5例，小管癌3例，粘液性癌2例；有淋巴转移48例，无淋巴转移32例；全部标本术前无放疗与化疗处理，均用甲醛固定以及石蜡包埋。
1.2方法将石蜡包埋的组织切成4μm厚的切片，经二甲苯脱蜡和梯度酒精水化后滴加3%的H2O2阻断内源性过氧化酶，孵育10min，然后用三羟甲基氨基甲烷缓冲液（trisbuffered saline，TBS）洗涤3次，置于95℃-100℃、pH6.0的柠檬酸缓冲液煮沸20min，再用TBS洗涤3次，滴加一抗（CXCR4 1：400）湿盒中37℃下孵育60min；TBS洗涤3次，滴加E-VISIONTM反应液，50μl/片，37℃下孵育30min；TBS洗涤3次，0.4%色源底物溶液3，3’-二氨基联苯胺（3，3’-diaminobenzidine，DAB）+0.3%H2O2孵育，光镜下观察到棕黄色反应后终止。最后用流水洗，苏木素复染，递增梯度酒精脱水，二甲苯透明，常规树脂封片[2]。
1.3疗效判定CXCL12、CXCR4半定量评分标准参照Shimizu等方法，按阳性强度和面积分别记为0、1、2、3分，根据两项记分之和判断其结果：<3分为（-），3分为（+），4分为（++），5-6分为（+++）[3]。
1.4统计学意义采用SPSS18.0统计软件包进行统计学处理，计量资料以χ±s表示，计数资料中的两因素构成比使用x2检验分析，相关性分析用非参数Spearman相关检验。当两组数据统计差异P<0.05時，说明具有统计学意义[4]。2结果
2.1CXCL12和CXCR4在乳腺细胞中的表达趋化因子CXCL12及其受体CXCR4主要在肿瘤细胞的细胞质中表达，免疫化组织呈棕黄色，且CXCL12和CXCR4在乳腺癌细胞中表达率分别为73.7%、62.5%明显高于正常乳腺细胞23.6%、20.3%，两组数据有明显统计学差异（P<0.01），统计有意义。
2.2CXCL12和CXCR4与临床病理的关系趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在乳腺癌细胞的表达与患者的年龄、肿瘤大小和分化程度无关，根据统计学分析处理（P>0.05），无统计学意义。而其与淋巴转移有密切联系，经统计学分析处理（P<0.01），具有统计学意义，见表1。