【摘 要】
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目的 探究沉默PD-1基因对腺相关病毒(AAV)8介导的乙型肝炎病毒(HBV)感染大鼠T细胞免疫应答的影响.方法 选取40只正常大鼠,随机选取10只不做处理,为正常组,其余30只建立AAV8介导的HBV感染大鼠模型,建模成功后,随机选取10只不增加处理,为模型组,将剩余20只模型大鼠分为沉默PD-1组与过表达PD-1组.其中沉默PD-1组进行沉默程序性死亡细胞受体-1(PD-1)干预,过表达PD-1组进行过表达PD-1干预.对大鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平进行检测与比
【机 构】
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成都大学附属医院血透室,四川成都610081;成都大学附属医院肾内科,四川成都610081;成都大学附属医院呼吸感染科,四川成都610081
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目的 探究沉默PD-1基因对腺相关病毒(AAV)8介导的乙型肝炎病毒(HBV)感染大鼠T细胞免疫应答的影响.方法 选取40只正常大鼠,随机选取10只不做处理,为正常组,其余30只建立AAV8介导的HBV感染大鼠模型,建模成功后,随机选取10只不增加处理,为模型组,将剩余20只模型大鼠分为沉默PD-1组与过表达PD-1组.其中沉默PD-1组进行沉默程序性死亡细胞受体-1(PD-1)干预,过表达PD-1组进行过表达PD-1干预.对大鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平进行检测与比较,RT-PCR法检测各组大鼠HBV DNA,使用流式细胞仪对CD8+细胞与T细胞表面PD-1分子表达检测及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)及Tim3阳性细胞率进行分析.结果 与正常组比较,模型组、过表达PD-1组及沉默PD-1组HB-sAg、HBeAg水平均较高,与模型组比较,过表达PD-1组HBsAg、HBeAg水平均较高,沉默PD-1组HBsAg、HBeAg水平均较低(P＜0.05);与正常组比较,模型组、过表达PD-1组及沉默PD-1组大鼠肝脏IFN-γ、TNF-α阳性细胞率均较低,Tim3阳性细胞率较高,与模型组比较,过表达PD-1组IFN-γ、TNF-α阳性细胞率均较低,Tim3阳性细胞率较高,沉默PD-1组IFN-γ、TNF-α阳性细胞率均较高,Tim3阳性细胞率较低(P＜0.05);与正常组比较,模型组、过表达PD-1组及沉默PD-1组大鼠CD8+淋巴细胞占比均较低,T细胞表面PD-1表达较高,与模型组比较,过表达PD-1组CD8+淋巴细胞占比较低,T细胞表面PD-1表达较高,沉默PD-1组CD8+淋巴细胞占比较高,T细胞表面PD-1表达较低(P＜0.05).结论 在AAV8介导的HBV感染大鼠中进行沉默PD-1基因干预,能够显著肝纤维化进程,提升T细胞的相关活性,对机体内免疫代谢功能进行调节,增强机体抗病毒能力,改善预后,提升机体免疫应答能力,抑制乙型肝炎病毒进展.
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