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【摘要】 目的 测定血小板CD61和CD62p的阳性率,探讨并总结川崎病病程中血小板活化标志物CD62p的阳性表达率的变化与临床诊断、疗效判定及冠状动脉异常之间的关系。方法 应用流式细胞仪检测25例川崎病患儿和16例正常对照组急性期血小板CD61和CD62p阳性表达率。结果 川崎病患儿全血CD61、CD62p阳性表达率较正常对照儿明显增高,具有统计学意义;合并冠状动脉异常者CD62p阳性表达率增高更加显著,CD62p阳性表达率增高具有统计学意义;CD62p的阳性表达率经丙种球蛋白和阿司匹林治疗后能明显减低,但仍高于正常对照儿,具有统计学意义。 结论 在川崎病免疫性血管炎的病理损害过程中,CD61和CD62p均显著增高,丙种球蛋白和阿司匹林治疗后能抑制KD患儿血小板膜糖蛋白CD62p的高表达,降低血小板的活化过程:川崎病病程过程中动态检测血小板活化标志物CD62p阳性表达率,对川崎病的诊断和疗效判定具有比较重要的临床意义,对预测冠状动脉异常是否发生更具有价值。
【关键词】 川崎病;血小板活化;CD61;CD62p
Clinical Significance ofCD61 and CD62p Variation in Kswasaki Disease
WANG Chun-yan,LI Ya-rui.Dedpartment of Pediatrics,the Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China
【Abstract】 Objective To investigate the clinical significance of plateletCD61 and CD62p variation in Kawasaki disease(KD).Methods The positive expression rates of CD61 and CD62p in KD patients weremeasured by flow cytometry.Results The positive expression rates of CD61 and CD62p in the KD patients were higher than those of normal controls,and they were more higher in coronary artery abnormalities;After aspirin and IVIG treatment,the positive expression rates of CD62p were lower than those before treatment.However,those after treatment were still higher than those in the normal controls.Conclusion Inthe pathological course of immunity vasculitis in KD,the platelet activation participates.The treatment of aspirin and IVIG can inhabit the high expression of CD61 and CD62p,and can degrade the degree of the platelet activation.Itis valuable in diagnosis and treatment effects judgment to have dynamic observation of the positive expression rates of CD62p,which is of high value in prediction of coronary artery abnormalities.
【Key words】Kawasaki disease; Platelet activation; CD61;CD62p
川崎病病理特点为系统性的血管炎,主要累及中等大小动脉,以冠状动脉受累最为常见。研究资料表明川崎病患儿呈高凝状态,处于血栓前状态,血小板显著增多,血小板被激活,血小板膜上出现血小板活化标志物的表达。国内外学者通过动物实验应用异体蛋白激发幼兔免疫性血管炎,发现其病理改变和川崎病的病理改变相似,冠状动脉有扩张,进一步证实了川崎病冠状动脉异常的存在。研究资料表明血小板增多和活化促进血栓形成,易导致动脉狭窄、闭塞、冠状动脉异常,因此血小板的活化和冠状动脉异常有着密切的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料 2009年3~9月在山西省儿童医院心血管科住院确诊为川崎病的25例患儿,符合厚生省川崎病研究课题组修订第5版的诊断标准[1]。其中男性患儿16例,女性患儿9例,男:女=1.8:1;年龄5个月~10岁,平均年龄为(29.68±28.63)月。诊断前发热时间为(6.88±2.78)d 。临床表现:25例川崎病患儿治疗前均有发热,多呈弛张热;12例合并冠状动脉异常,发生率为48%,冠状动脉扩张11例,冠状动脉瘤样扩展1例;出现皮疹20例,占80%;结膜充血22例,占88%,热退后渐消失;口唇皲裂18例,占72%,指趾硬肿及脱屑12例,占48%,淋巴结肿大24例,占96%。其他临床表现有:咳嗽15例,其中9例胸部X线正位片呈肺部炎症征象;腹痛、腹泻6例,出现关节肿痛4例,肝脏肿大2例,出现心脏杂音2例,均为心尖区II~III收缩期杂音;无菌性脑炎1例,心肌酶谱高于正常者11例。将同期16例健康儿设为正常对照组,其中男9例,女7例,男:女=1.3:1,年龄7个月~10岁,平均(29.93±30.19)个月。正常对照组与KD患儿的性别及年龄差异无统计学意义。
1.2 材料
1.2.1 主要试剂 ①荧光标记的抗血小板单克隆抗体(美国Becton Dickion公司提供):CD61-FIFC为异硫氰荧光标记的抗活化GP IIIa的单抗;CD62p-PE为藻红素标记的抗P-选择素单抗;MIgG-PE为藻红素标记的鼠IgG;MIgM-FIFC为异硫氰荧光标记的鼠IgM;②ADP激活剂:1×10-1M ADP激活剂;③固定液:1%甲醛PBS溶液:④ACD抗凝剂:3.8%复方枸橼酸纳溶液。
1.2.2 仪器 FACSCailbur 型流式细胞仪(美国Becton Dickion公司生产)。
1.3 治疗方法 所有川崎病患儿确诊后静脉给予人血免疫丙种球蛋白(丙球,山西康宝生物制品有限公司生产),总量2 g/kg,分2次隔天靜脉给予;同时给予阿司匹林30~50 mg/(kg•d),分3次口服,体温正常后一周改为3~5 mg/(kg•d),连用6~8周,有冠状动脉异常者用至冠状动脉恢复正常。
1.4 检测方法 测定方法:①采集标本:25例KD患儿和16例正常对照组于清晨抽取外周静脉血2 ml注入枸橼酸纳抗凝的真空采血管中,尽量保证一针见血,于10 min内送实验室并开始实验。ADP激活:装有50 μlADP,450 μl全血,立即漩涡1 s混匀,室温孵育5 min;②按照厂家说明进行单抗荧光染色标记:取流式细胞专用管2支,分别加入MIgM-FIFC/MIgM-PE、CD61-FIFC/CD62p-PE各5 μl并充分摇匀,置室温暗处孵育15~20 min后,加入0.5 mlPBS轻轻摇匀,立即上机检测;③结果分析:以CD61-FIFC和侧向角双参数设定血小板,以对照管设定阴性群体,采用CELLQuest软件获取血小板10 000个,对结果进行分析;④15例KD患儿,在静脉给予丙种球蛋白和阿司匹林治疗后第6~10天,且体温正常后抽血复查。
1.5 统计学方法 实验数据以均数±标准差(x±s)表示,用SPSS16.0统计软件进行统计学处理。两组资料比较,方差齐则用t检验,方差不齐则用秩和检验。P<0.05为有显著统计学意义,P<0.01为有非常显著统计学意义。
2 结果
2.1 川崎病患儿治疗前与正常对照组CD61、CD62p的检测结果比较 川崎病患儿治疗前全血CD61、CD62p阳性表达率较正常对照组明显增高,差异有显著统计学意义。见表1。
2.2 川崎病患儿治疗前后CD61、CD62p检测结果比较 15例川崎病患儿经治疗后,全血CD62p阳性表达率与治疗前比较有所降低,CD62p的阳性表达率差异有显著统计学意义。见表2。
2.3 川崎病患儿治疗后与正常对照组CD61、CD62p的检测结果比较 KD患儿治疗后全血CD61、CD62p阳性表达率与正常对照组相比仍高,差异均有显著统计学意义。见表3。
2.4 川崎病患儿合并冠状动脉异常与未合并冠状动脉异常者CD61、CD62p检测结果比较 合并冠状动脉异常者全血CD62p阳性表达率与未合并冠状动脉异常者相比均增高,具有非常显著统计学意义。见表4。
3 讨论
KD发病原因至今不明,发病机制尚未完全清楚,资料表明川崎病是一种免疫介导的全身血管炎损害,T细胞、B细胞及单核/巨噬细胞被激活并产生大量的各种细胞因子,激活体内免疫系统,造成血管内皮细胞和其他细胞损伤[2,3]。有研究表明血小板作为一种细胞急性时相反应物,与KD内皮损伤密切关联,血小板活化促进血栓形成为血管炎致动脉狭窄、闭塞、冠状动脉异常的主要病理基础[4]。
CD61(GPIII a)是由二硫键组成的单链,分子量为90 000,726个氨基酸组成,为跨膜蛋白,其膜外侧、跨膜区和膜内侧的氨基酸数分别是692、29和41个。CD61与CD41(GPII b)在Ca2+参与下以1:1的比例构成复合物。CD41/CD61(GPII b/III a)是血小板膜表面最多的糖蛋白分子,占血小板总蛋白量的18%,每个血小板表面约有5000个CD41/CD61,GPⅡb/III a是由a、B亚单位以非共价键连接而成的异二聚体,能表达多种受体功能,CD61是与纤维蛋白原(Fg)、纤维连接蛋白(Fn)、血管性血友病因子(vWF)等粘附分子结合的受体。作为受体CD41/CD61具有诱导性、表达(活化)的重要特性,该特性是血小板聚集和黏附反应的重要环节[5]。CD41/CD61经信号激活后,其构型发生改变,纤维蛋白原受体暴露,与纤维蛋白原的亲和力明显增加,引起血小板聚集,是血栓形成的最后的共同的通路[6,7]。血小板活化后10秒内CD41/CD61最大限度活化,是早期血小板活化的标志物[8]。
CD62p亦称血小板活化依赖性颗粒表面膜蛋白或P-选择素,属于细胞黏附分子中的选择素家族,富含半胱氨酸,分子量为140 000,正常情况下不表达或低水平表达,在血小板活化时与血小板表面的质膜融合,显著表达与血小板膜上。CD62p在血小板活化后10 min表达可达高峰[9],CD62p不被血浆蛋白所掩盖,不随时间的推移而消失,是活化血小板的特异性标志物[10] ;还介导血小板-内皮细胞间、血小板-中性粒细胞间、血小板-单核细胞间及血小板之间的黏附,参与血小板聚集、血栓形成、炎症和免疫反应,激活中性粒细胞,释放血管活性物质、氧化代谢产物,促使纤维蛋白原沉积等生物学效应发生,使血管内皮的损害加重[11] 。
本研究结果显示,川崎病患儿治疗前后CD62p都 呈高表达,虽然治疗后CD62p有所降低,但较正常对照组仍高,合并冠状动脉异常组CD62p表达显著高于未合并冠状动脉异常组,具有統计学意义。证实活化的血小板参与了全身血管炎的发病过程,检测CD62p阳性表达率可以反映川崎病患儿血小板活化程度,预测冠状动脉异常更具有意义。CD61是泛血小板特异性标志物,存在于各种激活和非激活血小板表面[12],KD患儿在治疗前后CD61均呈高表达,考虑与CD41/CD61的构型变化有关。
KD急性期治疗目的是控制全身非特异性血管炎症,防止冠状动脉瘤形成及血栓形成及血栓性阻塞。本研究结果显示:KD患儿经丙球和阿司匹林治疗后,CD62p阳性表达率显著降低,说明治疗有效,可降低血小板的活化程度;但经治疗后CD62p阳性表达率仍显著高于正常对照组,说明川崎病急性期及合并冠状动脉异常患儿的恢复期均存在血管内皮功能异常,恢复期也应抗凝治疗。大量研究表明,川崎病患儿急性期及合并冠状动脉异常患儿的恢复期均伴有血管内皮功能异常,并会长期存在[13],川崎病患儿最初的内皮功能异常导致了凝血异常及血管形态学异常。
川崎病病程过程中动态检测血小板活化标志物CD62p阳性表达率,对川崎病的诊断和疗效判定具有比较重要的临床意义,对预测冠状动脉异常是否发生更具有价值。
参考文献
[1] 杜忠东.川崎病.科学技术文献出版社,2009:74.
[2] Newburger JW,Takahashi M,Gerber MA,et al.Diagnosis,treatment,and long-term managerment of Kawassaki disease:a statement for health professionals from the Committee on Rheumatic Fever,Endocarditis,and Kawasaki Disease,Council on Cardiovascular Disease in the Young,American Heart Association.Pediatrics,2004,114:1708-1733.
[3] 杜忠东.川崎病病因和发病机制研究进展.中国实用儿科杂志,2006,21:24-726.
[4] Furukawa S,Mafsubara T,Umezawa,et al.Serum levels of P60 soluble tumor necrosis factor receptor duriing acute Kawasaki disease.J Pediatr,1994,124:721-725.
[5] Andrews RK,Fox JE.Platelet receptors in hemostasis.Curr Opin Cell Biol,1990,2(5):894-901.
[6] Shattil SJ,Newman PJ.Intergrins:dynamic scafffolds for adhesion and signaling in platelets.Blood,2004,104(6):1606-1615.
[7] 章靓,陈旺,庞文生.血栓形成机制及血小板膜糖蛋白GPII b/III a受体拮抗剂的研究进展.国际药学研究杂志,2009,36(4):269-269.
[8] Wakentin T E,Powling M J,Hardisty R M.Measurement of fibrinogen binding to platelet in whole blood by flow cytometry:a micro-method for the detection of platelet activation.Br J Haematol,1990,76:387-394.
[9] Merten M,Thiagarjan P.P-selectin expresson platelets deter mines size and stabilty of platelet aggregates.Circulation,2000,102:1931-1936.
[10] 周永列,张继业.血小板活化标志物及其临床意义.国外医学临床生物化学与检验分成,2000,21(6):299.
[11] Chen Y,Davis Gorman G,Watson R R,et al.Platelet CD62p Expression and Microparticle Formation in Murine Acquired Immune Ddficence Syndrome and Chronic Ethanol Consumpion.Alcohol& Alcoholism,2003,38(1):25-30.
[12] Moddeman PW.Clrster report:CD61.In:Knapp W,Dorken B,Gilks WR,et al.eds.Leucocyte Typing IV,White Cell Differentiation antigens.Qxford University Press,1989:1025.
[13] Mitani Y,Oishi N,Kurashige T.Antibodies to endothelial cells in Kawasaki disease lyse endothelial cells without cytokine pretreatment.Clin Exp Immunol,1997,107(1):120-126.
【关键词】 川崎病;血小板活化;CD61;CD62p
Clinical Significance ofCD61 and CD62p Variation in Kswasaki Disease
WANG Chun-yan,LI Ya-rui.Dedpartment of Pediatrics,the Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China
【Abstract】 Objective To investigate the clinical significance of plateletCD61 and CD62p variation in Kawasaki disease(KD).Methods The positive expression rates of CD61 and CD62p in KD patients weremeasured by flow cytometry.Results The positive expression rates of CD61 and CD62p in the KD patients were higher than those of normal controls,and they were more higher in coronary artery abnormalities;After aspirin and IVIG treatment,the positive expression rates of CD62p were lower than those before treatment.However,those after treatment were still higher than those in the normal controls.Conclusion Inthe pathological course of immunity vasculitis in KD,the platelet activation participates.The treatment of aspirin and IVIG can inhabit the high expression of CD61 and CD62p,and can degrade the degree of the platelet activation.Itis valuable in diagnosis and treatment effects judgment to have dynamic observation of the positive expression rates of CD62p,which is of high value in prediction of coronary artery abnormalities.
【Key words】Kawasaki disease; Platelet activation; CD61;CD62p
川崎病病理特点为系统性的血管炎,主要累及中等大小动脉,以冠状动脉受累最为常见。研究资料表明川崎病患儿呈高凝状态,处于血栓前状态,血小板显著增多,血小板被激活,血小板膜上出现血小板活化标志物的表达。国内外学者通过动物实验应用异体蛋白激发幼兔免疫性血管炎,发现其病理改变和川崎病的病理改变相似,冠状动脉有扩张,进一步证实了川崎病冠状动脉异常的存在。研究资料表明血小板增多和活化促进血栓形成,易导致动脉狭窄、闭塞、冠状动脉异常,因此血小板的活化和冠状动脉异常有着密切的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料 2009年3~9月在山西省儿童医院心血管科住院确诊为川崎病的25例患儿,符合厚生省川崎病研究课题组修订第5版的诊断标准[1]。其中男性患儿16例,女性患儿9例,男:女=1.8:1;年龄5个月~10岁,平均年龄为(29.68±28.63)月。诊断前发热时间为(6.88±2.78)d 。临床表现:25例川崎病患儿治疗前均有发热,多呈弛张热;12例合并冠状动脉异常,发生率为48%,冠状动脉扩张11例,冠状动脉瘤样扩展1例;出现皮疹20例,占80%;结膜充血22例,占88%,热退后渐消失;口唇皲裂18例,占72%,指趾硬肿及脱屑12例,占48%,淋巴结肿大24例,占96%。其他临床表现有:咳嗽15例,其中9例胸部X线正位片呈肺部炎症征象;腹痛、腹泻6例,出现关节肿痛4例,肝脏肿大2例,出现心脏杂音2例,均为心尖区II~III收缩期杂音;无菌性脑炎1例,心肌酶谱高于正常者11例。将同期16例健康儿设为正常对照组,其中男9例,女7例,男:女=1.3:1,年龄7个月~10岁,平均(29.93±30.19)个月。正常对照组与KD患儿的性别及年龄差异无统计学意义。
1.2 材料
1.2.1 主要试剂 ①荧光标记的抗血小板单克隆抗体(美国Becton Dickion公司提供):CD61-FIFC为异硫氰荧光标记的抗活化GP IIIa的单抗;CD62p-PE为藻红素标记的抗P-选择素单抗;MIgG-PE为藻红素标记的鼠IgG;MIgM-FIFC为异硫氰荧光标记的鼠IgM;②ADP激活剂:1×10-1M ADP激活剂;③固定液:1%甲醛PBS溶液:④ACD抗凝剂:3.8%复方枸橼酸纳溶液。
1.2.2 仪器 FACSCailbur 型流式细胞仪(美国Becton Dickion公司生产)。
1.3 治疗方法 所有川崎病患儿确诊后静脉给予人血免疫丙种球蛋白(丙球,山西康宝生物制品有限公司生产),总量2 g/kg,分2次隔天靜脉给予;同时给予阿司匹林30~50 mg/(kg•d),分3次口服,体温正常后一周改为3~5 mg/(kg•d),连用6~8周,有冠状动脉异常者用至冠状动脉恢复正常。
1.4 检测方法 测定方法:①采集标本:25例KD患儿和16例正常对照组于清晨抽取外周静脉血2 ml注入枸橼酸纳抗凝的真空采血管中,尽量保证一针见血,于10 min内送实验室并开始实验。ADP激活:装有50 μlADP,450 μl全血,立即漩涡1 s混匀,室温孵育5 min;②按照厂家说明进行单抗荧光染色标记:取流式细胞专用管2支,分别加入MIgM-FIFC/MIgM-PE、CD61-FIFC/CD62p-PE各5 μl并充分摇匀,置室温暗处孵育15~20 min后,加入0.5 mlPBS轻轻摇匀,立即上机检测;③结果分析:以CD61-FIFC和侧向角双参数设定血小板,以对照管设定阴性群体,采用CELLQuest软件获取血小板10 000个,对结果进行分析;④15例KD患儿,在静脉给予丙种球蛋白和阿司匹林治疗后第6~10天,且体温正常后抽血复查。
1.5 统计学方法 实验数据以均数±标准差(x±s)表示,用SPSS16.0统计软件进行统计学处理。两组资料比较,方差齐则用t检验,方差不齐则用秩和检验。P<0.05为有显著统计学意义,P<0.01为有非常显著统计学意义。
2 结果
2.1 川崎病患儿治疗前与正常对照组CD61、CD62p的检测结果比较 川崎病患儿治疗前全血CD61、CD62p阳性表达率较正常对照组明显增高,差异有显著统计学意义。见表1。
2.2 川崎病患儿治疗前后CD61、CD62p检测结果比较 15例川崎病患儿经治疗后,全血CD62p阳性表达率与治疗前比较有所降低,CD62p的阳性表达率差异有显著统计学意义。见表2。
2.3 川崎病患儿治疗后与正常对照组CD61、CD62p的检测结果比较 KD患儿治疗后全血CD61、CD62p阳性表达率与正常对照组相比仍高,差异均有显著统计学意义。见表3。
2.4 川崎病患儿合并冠状动脉异常与未合并冠状动脉异常者CD61、CD62p检测结果比较 合并冠状动脉异常者全血CD62p阳性表达率与未合并冠状动脉异常者相比均增高,具有非常显著统计学意义。见表4。
3 讨论
KD发病原因至今不明,发病机制尚未完全清楚,资料表明川崎病是一种免疫介导的全身血管炎损害,T细胞、B细胞及单核/巨噬细胞被激活并产生大量的各种细胞因子,激活体内免疫系统,造成血管内皮细胞和其他细胞损伤[2,3]。有研究表明血小板作为一种细胞急性时相反应物,与KD内皮损伤密切关联,血小板活化促进血栓形成为血管炎致动脉狭窄、闭塞、冠状动脉异常的主要病理基础[4]。
CD61(GPIII a)是由二硫键组成的单链,分子量为90 000,726个氨基酸组成,为跨膜蛋白,其膜外侧、跨膜区和膜内侧的氨基酸数分别是692、29和41个。CD61与CD41(GPII b)在Ca2+参与下以1:1的比例构成复合物。CD41/CD61(GPII b/III a)是血小板膜表面最多的糖蛋白分子,占血小板总蛋白量的18%,每个血小板表面约有5000个CD41/CD61,GPⅡb/III a是由a、B亚单位以非共价键连接而成的异二聚体,能表达多种受体功能,CD61是与纤维蛋白原(Fg)、纤维连接蛋白(Fn)、血管性血友病因子(vWF)等粘附分子结合的受体。作为受体CD41/CD61具有诱导性、表达(活化)的重要特性,该特性是血小板聚集和黏附反应的重要环节[5]。CD41/CD61经信号激活后,其构型发生改变,纤维蛋白原受体暴露,与纤维蛋白原的亲和力明显增加,引起血小板聚集,是血栓形成的最后的共同的通路[6,7]。血小板活化后10秒内CD41/CD61最大限度活化,是早期血小板活化的标志物[8]。
CD62p亦称血小板活化依赖性颗粒表面膜蛋白或P-选择素,属于细胞黏附分子中的选择素家族,富含半胱氨酸,分子量为140 000,正常情况下不表达或低水平表达,在血小板活化时与血小板表面的质膜融合,显著表达与血小板膜上。CD62p在血小板活化后10 min表达可达高峰[9],CD62p不被血浆蛋白所掩盖,不随时间的推移而消失,是活化血小板的特异性标志物[10] ;还介导血小板-内皮细胞间、血小板-中性粒细胞间、血小板-单核细胞间及血小板之间的黏附,参与血小板聚集、血栓形成、炎症和免疫反应,激活中性粒细胞,释放血管活性物质、氧化代谢产物,促使纤维蛋白原沉积等生物学效应发生,使血管内皮的损害加重[11] 。
本研究结果显示,川崎病患儿治疗前后CD62p都 呈高表达,虽然治疗后CD62p有所降低,但较正常对照组仍高,合并冠状动脉异常组CD62p表达显著高于未合并冠状动脉异常组,具有統计学意义。证实活化的血小板参与了全身血管炎的发病过程,检测CD62p阳性表达率可以反映川崎病患儿血小板活化程度,预测冠状动脉异常更具有意义。CD61是泛血小板特异性标志物,存在于各种激活和非激活血小板表面[12],KD患儿在治疗前后CD61均呈高表达,考虑与CD41/CD61的构型变化有关。
KD急性期治疗目的是控制全身非特异性血管炎症,防止冠状动脉瘤形成及血栓形成及血栓性阻塞。本研究结果显示:KD患儿经丙球和阿司匹林治疗后,CD62p阳性表达率显著降低,说明治疗有效,可降低血小板的活化程度;但经治疗后CD62p阳性表达率仍显著高于正常对照组,说明川崎病急性期及合并冠状动脉异常患儿的恢复期均存在血管内皮功能异常,恢复期也应抗凝治疗。大量研究表明,川崎病患儿急性期及合并冠状动脉异常患儿的恢复期均伴有血管内皮功能异常,并会长期存在[13],川崎病患儿最初的内皮功能异常导致了凝血异常及血管形态学异常。
川崎病病程过程中动态检测血小板活化标志物CD62p阳性表达率,对川崎病的诊断和疗效判定具有比较重要的临床意义,对预测冠状动脉异常是否发生更具有价值。
参考文献
[1] 杜忠东.川崎病.科学技术文献出版社,2009:74.
[2] Newburger JW,Takahashi M,Gerber MA,et al.Diagnosis,treatment,and long-term managerment of Kawassaki disease:a statement for health professionals from the Committee on Rheumatic Fever,Endocarditis,and Kawasaki Disease,Council on Cardiovascular Disease in the Young,American Heart Association.Pediatrics,2004,114:1708-1733.
[3] 杜忠东.川崎病病因和发病机制研究进展.中国实用儿科杂志,2006,21:24-726.
[4] Furukawa S,Mafsubara T,Umezawa,et al.Serum levels of P60 soluble tumor necrosis factor receptor duriing acute Kawasaki disease.J Pediatr,1994,124:721-725.
[5] Andrews RK,Fox JE.Platelet receptors in hemostasis.Curr Opin Cell Biol,1990,2(5):894-901.
[6] Shattil SJ,Newman PJ.Intergrins:dynamic scafffolds for adhesion and signaling in platelets.Blood,2004,104(6):1606-1615.
[7] 章靓,陈旺,庞文生.血栓形成机制及血小板膜糖蛋白GPII b/III a受体拮抗剂的研究进展.国际药学研究杂志,2009,36(4):269-269.
[8] Wakentin T E,Powling M J,Hardisty R M.Measurement of fibrinogen binding to platelet in whole blood by flow cytometry:a micro-method for the detection of platelet activation.Br J Haematol,1990,76:387-394.
[9] Merten M,Thiagarjan P.P-selectin expresson platelets deter mines size and stabilty of platelet aggregates.Circulation,2000,102:1931-1936.
[10] 周永列,张继业.血小板活化标志物及其临床意义.国外医学临床生物化学与检验分成,2000,21(6):299.
[11] Chen Y,Davis Gorman G,Watson R R,et al.Platelet CD62p Expression and Microparticle Formation in Murine Acquired Immune Ddficence Syndrome and Chronic Ethanol Consumpion.Alcohol& Alcoholism,2003,38(1):25-30.
[12] Moddeman PW.Clrster report:CD61.In:Knapp W,Dorken B,Gilks WR,et al.eds.Leucocyte Typing IV,White Cell Differentiation antigens.Qxford University Press,1989:1025.
[13] Mitani Y,Oishi N,Kurashige T.Antibodies to endothelial cells in Kawasaki disease lyse endothelial cells without cytokine pretreatment.Clin Exp Immunol,1997,107(1):120-126.