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目的:研究人参糖肽的结构,探讨其对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)处理PC12细胞凋亡的保护作用,为开发人参抗阿尔茨海默病(AD)药物奠定理论基础。方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)与Q Exactive Orbitrap质谱联用分析人参糖肽结构。将鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞分为6组,加入含不同浓度(0、6.25、12.50、25.00、50.00和100.00μmol·L-1)Aβ25-35的培养基,采用细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法测定PC12细胞的存活率。将PC12细胞分为空白对照组、模型组和给药组,模型组加入含有50.00μmol·L-1Aβ25-35的培养基,给药组加入不同浓度(0.03、0.10、0.30和1.00g·L-1)人参糖肽和含有50.00μmol·L-1Aβ25-35的培养基。采用CCK-8法测定PC12细胞的存活率,采用AnnexinⅤ-FITC/PI法测定人参糖肽和Aβ25-35处理后PC12细胞的凋亡率。将PC12细胞分为空白对照组、模型组和人参糖肽给药组,模型组加入含有50.00μmol·L-1 Aβ25-35的培养基,给药组加入不同浓度(0.10和0.30g·L-1)人参糖肽和含有50.00μmol·L-1 Aβ25-35的培养基,采用流式细胞术测定不同细胞周期PC12细胞的百分比。结果:人参糖肽结构分析得到肽链为NLSHYHSGSS、糖基为N1-HexNAc,肽链为SGSSSSSSSEDDGMGR、糖基为S6-HexNAc等20多个人参糖肽结构。当Aβ25-35浓度为50μmol·L-1时,PC12细胞存活率为(55.45±2.34)%;与空白对照组比较,不同浓度Aβ25-35处理组PC12细胞存活率明显降低(P<0.01)。与空白对照组比较,模型组PC12细胞存活率明显降低(P<0.01);与模型组比较,给药组细胞存活率明显升高(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组PC12细胞凋亡率升高(P<0.01);与模型组比较,给药组细胞凋亡率降低(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组S期PC12细胞百分比升高(P<0.05);与模型组比较,给药组S期PC12细胞百分比降低(P<0.05)。结论:利用质谱法分析得到人参糖肽结构。人参糖肽可有效抑制Aβ25-35处理PC12细胞的凋亡,具有神经细胞保护作用,其抗凋亡活性作用可能与抑制细胞S期阻滞有关。