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目的:本文为进一步研究蛋白O-GlcNAc糖基化修饰提供重要资源.方法:为了探索制备纯化具有生物学活性的重组OGT的有效方法,本文用大肠杆菌和Hi5昆虫细胞表达并纯化具有活性的重组 OGT.携带人OGT cDNA的PET32a质粒在大肠杆菌中表达出带有1个S-Tag的重组人OGT融合蛋白,然后用与S-蛋白质偶联的琼脂糖凝胶颗粒从细菌裂解液中亲和纯化OGT融合蛋白.结果:其纯化的OGT在电泳中显现单一条带并具有生物活性,但其活性在洗脱后丧失.在Hi5昆虫细胞中表达的鼠肝OGT带有一His6tag,经镍离子螯