影响HBV DNA荧光实时定量PCR测定的标本因素

来源 :温州医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mdjsh123
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目的 :探讨影响HBVDNA荧光实施定量PCR测定的标本因素。方法 :按不同要求收集特定的临床标本 ,用沉淀煮沸裂解法提取DNA模板 ,用荧光实时定量PCR法测定HBVDNA的含量。结果 :经EDTA、中等含量肝素、枸橼酸钠抗凝血浆标本与相应血清标本测定HBV DNA的含量差异无显著性 (F值分别为 2 .13、3.94、0 .76 ;P均 >0 .0 5 ) ,但高浓度肝素 (10 0 0U/ml)抗凝管则显著性减低 (F =2 5 .96 ,P <0 .0 5 ) ;溶血、高血脂标本对HBVDNA含量测定无显著影响 (F值分别为 0 .6 5、0 .0 1;P均 >0 .0 5 ) ;标本反复冻融对HBV DNA含量无明显变化 ,血浆 (清 )样本可在室温下短期储存 (4 8h内 ) ,对HBV DNA含量无明显影响 (F值为 3.5 3和 0 .76 ;P >0 .0 5 )。结论 :不同样本收集、储存条件对HBVDNA定量结果准确性的影响有重要意义 ,而提取DNA会间接决定收集、储存条件对定量结果的干扰。用沉淀煮沸裂解法可使抗凝剂及其他PCR反应抑制物质对HBVDNA测定结果影响减到最低 ,从而降低对标本采集的要求。
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