MicroRNA-29b重组慢病毒表达载体的构建及其抑制胃癌细胞系的迁移和增殖

来源 :基础医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ernest5
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的构建has-miR-29b重组慢病毒的表达载体,并观察其对胃癌细胞系迁移和增殖能力的影响。方法将PCR扩增的miR-29b前体序列和pMIR载体经双酶切后连接产生pMIR-miR-29b慢病毒表达载体。pMIR-miR-29b、Packaging Plasmid(s)和pVSV-G质粒共转染包装细胞系293TN,包装产生慢病毒。使用收获的慢病毒颗粒感染胃癌细胞系HGC-27,72 h后利用real-time PCR检测miR-29b在HGC-27内的表达水平,Western blot检测其靶基因MCL-1的表达。划痕实验和细胞增殖实验分别观察在HGC-27细胞中过表达miR-29b后细胞迁移能力及增殖能力的变化。结果成功构建了miR-29b重组慢病毒的表达载体,感染胃癌细胞HGC-27后,能够成功过表达miR-29b。在HGC-27细胞中过表达miR-29b,其靶基因MCL-1的表达明显被抑制,并且Lenti-29b组与对照组Untreat组和Lenti-vector组相比,Lenti-29b组的迁移能力显著降低(P<0.01);Lenti-29b组与Lenti-vector组相比,Lenti-29b组在48、72及96 h 3个时间点的增殖能力均显著下降(P<0.01)。结论成功获得过表达miR-29b的重组慢病毒颗粒,miR-29b能够抑制其靶基因MCL-1的表达,并对HGC-27细胞的迁移和增殖有明显的抑制作用。
其他文献
单点定时控制系统是我国中小城市交叉口的主要控制系统,其简单的操作流程、安全、可靠度高被各地所青睐。国内外单点定时交通信号机主要实现多时段多相位控制方式。相位时段
电视剧至今已成为全球电视受众生活中不可或缺的一部分。以“边拍边播”为特征的周播剧能够根据观众的要求改写剧情,满足了当下电视剧受众的心理需求,已成为全球的主流电视剧
在全球化背景下,基础教育信息化成为世界各国教育信息化的基础和先导。伴随着信息时代学习方式的变革,国外和国内相继掀起了微课的实践热潮。通过梳理国内外微课发展及研究方
研究目的:探讨妇科腹腔镜术中容量控制反比通气对肥胖患者心肺功能及炎症因子的影响。实验3-法:麻醉前30min肌肉注射阿托品0.5mg,苯巴比妥钠0.1g。入室后建立静脉通路,监护生命
目的构建OPN-siRNA的慢病毒载体,探讨其对结肠癌SW480细胞增殖的调节作用。方法设计合成针对OPN的siRNA序列,退火形成双链DNA并克隆到pSicoR质粒后,包装重组慢病毒。应用Real
目的观察膈肌生物反馈训练(DBT)联合质子泵抑制剂(PPI)治疗胃食管反流(GER)相关性咳嗽的效果。方法 11例GER相关性咳嗽患者,填写问卷后学习DBT方法 ,同时服用PPI(雷贝拉唑10
美国货币政策中介目标的调整及中美货币政策环境的差异何建雄,黄兴海一、美国货币政策中介目标调整的原因及其影响七十年代中期以来,货币总量的变化,尤其是广义货币(M2)的变化,既是美
LED照明成为21世纪最引人注目的新技术领域之一,而功率型LED优异的散热特性和光学特性更能适应普通照明领域的需要。提出了一种电学法测量功率LED热阻的新方法,根据LED正向电
针对半导体发光二极管(LED)参数检测仪器智能化程度不高、功能单一、效率低等缺陷,利用功能强大的C8051F020单片机,结合高精度数控恒流/恒压电源技术,光电转换处理技术和虚拟
电力通信网是广域保护控制系统运行的基础。文章通过分析广域保护控制系统的功能和结构,明确了该系统运行需要互相交换的信息类别,各类信息的通信传送需求,以及系统单站对电