【摘 要】
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目的 观察长链非编码RNA(LncRNA)LOC653786在肺癌细胞吉西他滨耐药中的作用及机制.方法 构建吉西他滨耐药肺癌细胞A549(A549/GR),MTT法检测细胞增殖能力;RT-qPCR检测LOC653786表达水平;siRNA转染法沉默LOC653786或FOXM1表达;免疫荧光检测转染细胞荧光表达情况;蛋白印记实验检测FOXM1、MRP1和P-gp蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 A549/GR细胞构建完成,耐药指数为6.0.相较于A549细胞,A549/GR细胞LOC653786
【机 构】
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丽水市中医院药剂科,浙江 丽水323000
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目的 观察长链非编码RNA(LncRNA)LOC653786在肺癌细胞吉西他滨耐药中的作用及机制.方法 构建吉西他滨耐药肺癌细胞A549(A549/GR),MTT法检测细胞增殖能力;RT-qPCR检测LOC653786表达水平;siRNA转染法沉默LOC653786或FOXM1表达;免疫荧光检测转染细胞荧光表达情况;蛋白印记实验检测FOXM1、MRP1和P-gp蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 A549/GR细胞构建完成,耐药指数为6.0.相较于A549细胞,A549/GR细胞LOC653786表达水平显著升高(P<0.01),FOXM1、MRP1和P-gp蛋白表达明显上调(P<0.01).沉默LOC653786显著下调A549/GR细胞FOXM1、MRP1和P-gp蛋白表达(P<0.01).沉默FOXM1蛋白表达可显著下调A549/GR细胞MRP1和P-gp蛋白表达(P<0.01).沉默LOC653786或FOXM1均可增强吉西他滨诱导的A549/GR细胞凋亡(P<0.01).结论 LncRNA LOC653786能介导FOXM1蛋白表达,从而诱导MRP1和P-gp蛋白表达上调,最终参与吉西他滨耐药.
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