【摘 要】
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为研究乳酸菌载体细胞表面锚定结合展示外源蛋白,本研究将禽流感病毒(AIV)H5N1亚型血凝素HA1基因克隆于pET-28a载体中,同时PCR扩增编码S-层蛋白的锚定区域基因Slap-C,并插入HA1
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
【基金项目】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室自主研究课题(SKLVBP201310)
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为研究乳酸菌载体细胞表面锚定结合展示外源蛋白,本研究将禽流感病毒(AIV)H5N1亚型血凝素HA1基因克隆于pET-28a载体中,同时PCR扩增编码S-层蛋白的锚定区域基因Slap-C,并插入HA1基因下游构建重组表达质粒pET-HA1-Slap,转化于E.coli BL21中进行HA1-Slap融合蛋白的表达,SDS-PAGE检测显示表达的HA1-Slap主要以包涵体形式存在。融合蛋白经镍柱纯化、透析复性,与氯化锂处理的嗜酸乳杆菌混合孵育,SDS-PAGE和间接免疫荧光检测表明HA1-Slap锚定结合并
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