重组人载脂蛋白AI米兰突变体在大肠杆菌中的高表达

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【摘要】

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用RT-PCR法从人肝总RNA库中克隆出人载脂蛋白AI的cDNA序列,再通过重叠PCR将载脂蛋白AI的第179位精氨酸密码子突变成半胱氨酸密码子,即载脂蛋白AI米兰突变体基因.将此目的基因

【作者】

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黎明赵洪亮薛冲张伟张士猛熊向华刘志敏

【机构】

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军事医学科学院

【出处】

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生物技术通讯

【发表日期】

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2003年3期

【关键词】

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载脂蛋白AI米兰突变体大肠杆菌表达重组 apolipoprotein A-I-Milano recombination expression E.coli

【基金项目】

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国家科技专项基金

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论文部分内容阅读

用RT-PCR法从人肝总RNA库中克隆出人载脂蛋白AI的cDNA序列,再通过重叠PCR将载脂蛋白AI的第179位精氨酸密码子突变成半胱氨酸密码子,即载脂蛋白AI米兰突变体基因.将此目的基因克隆至表达载体pQE30,重组质粒转化JM109宿主菌,经表达试验筛选出高表达克隆;工程菌经诱导后表达出含6个氯基酸前肽的载脂蛋白AI米兰突变体.表达产物主要以可溶形式存在,但也有部分为包涵体.

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