探讨过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对心脏移植小鼠心肌保护机制。
方法30只BALB/c随机分为对照组和实验组,实验组小鼠经尾静脉注射心肌特异性表达的SIRT1-Flag腺相关病毒,对照组小鼠经尾静脉对照腺相关病毒。在表达4周后,分别以两组小鼠心脏作为供体,C57BL/6作为受体,采用Cuff血管吻合术进行异位心脏移植。观察术后移植心脏的成活率。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析两组受体小鼠外周血炎症因子的水平;采用生化反应法检测外周血超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平;采用原位缺口末端标记法(TUNEL)法分析心肌细胞凋亡水平,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析心肌组织凋亡蛋白的表达水平。
结果与对照组小鼠心脏存活时间[(7.41±2.14) d]比较,实验组小鼠心脏存活时间[(12.46±3.14) d]明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组外周血白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)[(189.10±15.39)、(209.44±10.98)、(59.21±9.90) mmol/L]比较,实验组小鼠外周血IL-1β、IL-6和TNF-α[(55.12±11.32)、(41.32±9.21)、(29.44±7.80) mmol/L]显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组小鼠外周SOD和MDA水平[(6.19±1.20)、(3.44±0.76) mmol/L]比较,实验组小鼠外周血SOD[(3.09±0.89) U/ml]显著升高,MDA[(2.01±0.45) μmol/L]水平显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组心肌细胞凋亡指数(48.32±9.12)比较,实验组小鼠心肌凋亡指数(10.45±5.59)显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组小鼠半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)表达水平比较,实验组小鼠心肌Caspase-3表达显著下调,而bcl-2表达显著上调,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论在心肌组织过表达SIRT1可明显降低移植心脏炎症、氧化应激和凋亡水平,延长移植心脏存活时间。