T淋巴细胞清除促进脐血造血细胞的体外扩增

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采用抗CD3或抗CD8单克隆抗体的补体细胞毒方法清除脐血单个核细胞(MNC)中T淋巴细胞,CD34免疫亲和柱纯化MNC中CD34+细胞,流式细胞技术(FACS)分析细胞表面标志.将CD34+细胞中加入含多种造血生长因子的培养基进行体外液态扩增,并观察粒-巨噬集落(CFU-GM)和多向祖细胞集落(CFU-GEMM)形成能力.结果CD3+或CD8+细胞清除组和MNC经CD34免疫亲和柱纯化后,CD34+细胞分别为59.52%、56.70%和50.72%,比未纯化组(1.07%)纯度大幅度提高.抗CD3单抗清除+CD34纯化组和单纯CD34纯化组经造血生长因子刺激培养第14天,细胞总数分别扩增110.40倍和87.00倍.抗CD3单抗清除+CD34纯化组、抗CD8单抗清除+CD34纯化组和单纯CD34纯化组的CFU-GM产率分别为286.50±12.02、288.50±17.68和219.50±53.03,前者虽高于后者,但差异无显著性.CFU-GEMM产率分别为376.67±43.24、438.33±36.73和311.00±40.11,抗CD3单抗清除+CD34纯化组无显著差异,抗CD8单抗清除+CD34纯化组显示出显著性作用(P<0.05).
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