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目的
观察持续性高糖及波动性高糖对MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响。
方法将体外培养的MC3T3-E1成骨细胞分为正常对照组、N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine，NAC)组、持续性高糖组、持续性高糖+NAC组、波动性高糖组和波动性高糖+NAC组。采用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力，Annexin-FITC/PI染色及流式细胞仪检测细胞凋亡率，Western印迹检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平，DCFH-DA探针观察各组氧化应激水平。
结果与正常对照组相比，持续高糖组和波动性高糖组细胞增殖下降(P<0.01)，波动性高糖组细胞增殖下降更为明显(P<0.05)。与正常对照组相比，持续性高糖组和波动性高糖组细胞凋亡率升高(P<0.05或P<0.01)。波动性高糖组较持续性高糖组细胞凋亡更显著(P<0.01)。与正常对照组相比，持续高糖组和波动性高糖组Bcl-2蛋白表达均明显减少(P<0.01)，Bax表达增加(P<0.05或P<0.01)。与持续性高糖组比较，波动性高糖组Bcl-2表达减少(P<0.05)，Bax表达增多(P<0.05)。持续性高糖及波动性高糖组细胞内活性氧簇(ROS)生成量增多，波动性高糖组更加明显。NAC抑制ROS生成、增加Bcl-2表达、减少Bax表达，并且减少了细胞凋亡。
结论波动性高糖比持续性高糖更能引起细胞内氧化应激水平的升高，从而导致MC3T3-E1成骨细胞增殖下降、凋亡增多。